【摘 要】
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目的 筛选多株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)菌株,提供可作为疫苗研发使用的备选菌株,并对其进行小鼠交叉保护性的初步评估.方法 通过抗生素耐药性、毒力试验筛选铜绿假单胞菌疫苗候选株,采用不同孔径膜包(相对分子质量分别为300000、500000及1000000)对类毒素(toxoid)进行纯化工艺研究,并对其免疫原性及同源交叉保护性进行研究,评估候选株是否适用于疫苗研发.结果 铜绿假单胞菌疫苗候选株均具有多重耐药性,尤其对四环素和氯霉素耐药性较高,分别为96.30%和88
【机 构】
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辽宁成大生物股份有限公司研发部,辽宁 沈阳110179;辽宁省检验检测认证中心微生物室,辽宁 沈阳110016
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目的 筛选多株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)菌株,提供可作为疫苗研发使用的备选菌株,并对其进行小鼠交叉保护性的初步评估.方法 通过抗生素耐药性、毒力试验筛选铜绿假单胞菌疫苗候选株,采用不同孔径膜包(相对分子质量分别为300000、500000及1000000)对类毒素(toxoid)进行纯化工艺研究,并对其免疫原性及同源交叉保护性进行研究,评估候选株是否适用于疫苗研发.结果 铜绿假单胞菌疫苗候选株均具有多重耐药性,尤其对四环素和氯霉素耐药性较高,分别为96.30%和88.89%,但对亚胺培南、环丙沙星敏感,耐药性仅为14.81%和18.52%.其中,耐受5种以上的占83.33%;毒力较强的菌株分别为PA101和PA36.类毒素经相对分子质量分别为300000、500000及1000000的孔径膜包处理后,与对照组相比类毒素收率分别为89.95%、95.52%及97.99%;内毒素残留量分别为≤107.39 EU/μg蛋白、≤101.13 EU/μg蛋白和98.58~985.80 EU/μg蛋白;与对照组相比,500000组类毒素热原检测为阴性;免疫原性结果表明500000组、1000000组与对照组一致,均≥70%.与PA36比较,PA101类毒素对疫苗候选株免疫原性均≥70%.除PA15和PA46外,13株同源菌株交叉保护性在50%~100%之间,其中保护性≥70%的占92.31%.结论 铜绿假单胞菌PA101类毒素抗原对候选菌株具有保护性,对同源其他菌株也具有一定的保护性作用,为后续铜绿假单胞菌医院获得性感染性的预防研究提供了数据支持.
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