【摘 要】
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在TB培养基的基础上,通过单因素分析和正交设计对重组大肠杆菌产角质酶-CBM发酵进行优化,得到最适培养基的组分为:甘油5 g/L,蛋白胨16 g/L,MgSO4.7H2O 2.5 mmol/L,K2HPO413.7
【机 构】
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江南大学食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家“863”计划(2009AA02Z204);国家自然科学基金(30970057);国家杰出青年基金(20625619);江苏省六大人才高峰支持计划(08-B-吴敬)资助项目
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在TB培养基的基础上,通过单因素分析和正交设计对重组大肠杆菌产角质酶-CBM发酵进行优化,得到最适培养基的组分为:甘油5 g/L,蛋白胨16 g/L,MgSO4.7H2O 2.5 mmol/L,K2HPO413.7 g/L,KH2PO41.53 g/L,菌体生长至对数前中期时添加终浓度为1 g/L乳糖和0.75 g/L甘氨酸,30℃发酵48 h,角质酶-CBM产量可达63 U/ml,较TB培养(20 U/ml)提高了近3倍。考察了热激作用、渗透调节物质及温度两控制对角质酶-CBM分泌表达的影响,在添加Lactose和Glycine后,发现在添加终浓度为75 mmol/L的L-脯氨酸,37℃热激1 h或47℃热激0.5 h,变温至25℃发酵,角质酶-CBM产量可达90 U/ml,较TB恒温培养提高了近四倍。
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