探讨依维莫司是否增加顺铂对人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的杀伤效应。

分别用50、100、200 nmol/L的依维莫司和25 μmol/L顺铂处理人皮肤鳞状细胞癌系COLO-16细胞12、24 h，用AO标记自噬体囊泡并结合溶酶体酶抑制剂分析自噬和自噬流水平。Western印迹分析自噬标记性分子LC3-Ⅰ→LC3-Ⅱ转化、Caspase 3和PARP剪切；LDH释放实验分析细胞死亡；Annexin V-EGFP染色分析细胞凋亡。

50、100、200 nmol/L的依维莫司处理COLO-16细胞后，12 h LC3-Ⅰ→LC3-Ⅱ转换值分别为3.52 ± 0.21、4.03 ± 0.39、5.05 ± 0.22，两两之间比较，差异无统计学意义（P > 0.05），与未用药物处理的对照组（2.07 ± 0.05）比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。24 h LC3-Ⅰ→LC3-Ⅱ转换值分别为3.38 ± 0.26、3.29 ± 0.06、6.57 ± 0.16，两两之间比较，差异无统计学意义（P > 0.05），与对照组（2.61% ± 0.16%）比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。50、100、200 nmol/L的依维莫司联合E64d、pepstatin处理COLO-16细胞12 h后，LC3-Ⅱ与β肌动蛋白的比值分别为1.26 ± 0.40、1.16 ± 0.34、1.21 ± 0.39，与E64d、pepstatin单独处理细胞组（1.19 ± 0.27）比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。100 nmol/L依维莫司联合E64d、pepstatin自噬体囊泡表达阳性率2.06 ± 0.61，与E64d、pepstatin单独处理细胞组（1.68 ± 0.62）比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。依维莫司与顺铂联合处理24 h细胞死亡率42.58% ± 0.93%，高于顺铂单独处理的细胞（死亡率18.20% ± 1.46%），差异有统计学意义。依维莫司联合顺铂处理与顺铂单独处理细胞相比，Caspase 3和PARP剪切、Annexin V标记细胞数以及LC3-Ⅱ形成均无统计学差异（P > 0.05）。

依维莫司增强顺铂诱导COLO-1细胞死亡，这种效应不依赖于凋亡和自噬调控。