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摘要 目的：考察热毒宁注射液中绿原酸在6种常用输液中的稳定性，为临床用药提供依据。方法：采用高效液相色谱法测定热毒宁注射液中绿原酸在6种常用输液中12 h内的含量变化，观察溶液颜色，测定pH变化。结果：热毒宁注射液加入6种输液后放置12 h，颜色无明显变化，未见沉淀生成，pH改变不大，绿原酸含量变化不显著。结论：热毒宁注射液在6种常用输液中12 h内稳定性良好。
关键词 热毒宁注射液 绿原酸 稳定性 HPLC
中图分类号：R942 文献标识码：B 文章编号：1006—1533(2009)08-0373-03
热毒宁注射液是中成药注射剂复方剂型，由青蒿、金银花、栀子组成，不含动物药和矿物药，具有清热解毒、疏风解表的作用，临床用于上呼吸道感染(外感风热证)所致的高热、微恶风寒、头痛、咳嗽、痰黄等证。目前，热毒宁注射液广泛应用于临床，以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液和0.9％氯化钠注射液等常用输液稀释后静脉滴注给药。但笔者未见有关该液与各种输液配伍的稳定性研究的报道。笔者以配伍后混合溶液外观、pH值及注射液中的主要成分绿原酸为指标，考察了热毒宁注射液与5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、木糖醇注射液和缩合葡萄糖氯化钠注射液这6种常用输液中放置12 h后的配伍稳定性。
1 仪器与试药
1.1 仪器
美国Agilent HP1100系列高效液相色谱仪(Aglient G1310A单元泵，Aglient G1316A柱温箱，Aglient G1314A可变波长检测器，威马龙工作站)；隔膜真空泵(天津市腾达过滤器件厂)；10万分之一电子天平(Ohaus)；PHS－25数显pH计(上海精科雷磁仪器厂)；SD：3200超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)。
1.2 药品与试剂
绿原酸对照品(广西医科大学精制，批号：20071210)，纯度98.7％；热毒宁注射液(江苏康缘药业股份有限公司，规格：10 mL／支，批号：080601)；5％葡萄糖注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080807—104)，10％葡萄糖注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080806—101)，0.9％氯化钠注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080803103)，复方氯化钠注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080528102)；木糖醇注射液(安徽环球药业股份有限公司，批号：A080107—9)；缩合葡萄糖氯化钠注射液(重庆大新药业股份有限公司，批号：08010004—1)；乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：T20070718)；甲醇、冰醋酸均为色谱纯；水为重蒸水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱SinoChrom ODS—AP(4.6 mm×250mm，5岬)，流动相：乙腈－水－冰醋酸(13：87：0.2)；流速：0.8mL／min；检测波长：327mm；柱温30℃；进样量20uL。
2.2 溶液配制
2.2.1 对照品溶液的配制
精密称取绿原酸对照品25.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，制成0.5mg／mL的对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的配制
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液10 mL分别加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化钠注射液(c)、复方氯化钠注射液(D)、木糖醇注射液(E)和缩合葡萄糖氯化钠注射液(F)250 mL中配成样品溶液，摇匀。精密吸取各样品溶液1mL，置10mL容量瓶中，用流动相稀释定容，即得。
2.2.3 阴性对照液的配制
按处方比例和配方，制得不含金银花的阴性对照样品。按2.2.2项下方法制成阴性对照液。
2.2.4 专属性实验
分别取绿原酸对照品溶液、各样品制成的供试品溶液和阴性对照液进样20uL测定色谱图。结果表明：阴性对照液中其它成分对样品的测定无干扰。
2.3 线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液适量，分别加流动相稀释至绿原酸10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100.ug／mL系列浓度，分别进样20汕进行测定，记录峰面积(A)，并以浓度(c，ug/mL)对吸收峰面积(A)作标准曲线，得线性方程为：A=6 521C-9.660 2(r=0.999 5)。结果表明，绿原酸在浓度范围10～100ug/mL内线性良好。
2.4 精密度试验
精密吸取绿原酸对照品溶液20uL，重复进样6次，测定绿原酸峰面积，计算绿原酸峰面积平均值为4 108 924，RSD为0.3％(n=6)。结果表明，仪器精密度良好。
2.5 重复性实验
将热毒宁注射液在5％葡萄糖注射液中的样品按照2.2.2项下供试品的配制方法，分别配制6份，测定绿原酸含量基本相同，RSD为0.2％，结果表明，本法重复性好。
2.6 加样回收率试验
精密取相同热毒宁注射液1 mL共6份，分别精密加入绿原酸对照品适量，按照2.2.2项下样品溶液的制备方法制得低、中、高这3种不同浓度的供试液，并按上述色谱条件测定峰面积并计算回收率。结果见表1，平均回收率为101.2％。RSD为1.3％(n=6)。
2.7 配伍稳定性考察
2.7.1 绿原酸的测定
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液10 mL分别加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化钠注射液(c)、复方氯化钠注射液(D)、木糖醇注射液(E)和缩合葡萄糖氯化钠注射液(F)各250mL中配成样品溶液，摇匀。于0、1、2、4、8、12 h精密吸取各样品液1 mL，用流动相稀释定容至10 mL，进样20uL，测定峰面积，计算绿原酸含量，结果见表2。
2.7.2 配伍溶液的制备与稳定性考察
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液适量，分置于6个量瓶中，分别以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、木糖醇注射液和缩合葡萄糖氯化钠注射液稀释制成4％(mL／mL)的溶液，混匀，室温放置，于0、1、2、4、8、12 h作外观、pH值检查。
热毒宁注射液与6种输液配伍后，经室温放置，各配伍液未见明显变化，未出现沉淀、气泡等,pH值测定结果见表3。
3 讨论
热毒宁注射液与各输液配伍、室温放置，各配伍液绿原酸含量变化不显著，说明在上述实验条件下热毒宁注射液与6种常用输液配伍12 h内稳定性较好。
3.1 检测波长的选择
本品中含有绿原酸和桅子苷两个成分，《中华人民共和国药典》2005年版一部收载了单个组分的测定条件。紫外扫描结果表明，绿原酸在327mm波长处有较强的紫外吸收，故选定327 mm作为绿原酸的检测波长。
3.2 流动相的选择
金银花是热毒宁注射液的主要成分之一，绿原酸是金银花的主要有效成分，它的含量主要是以绿原酸的含量来计算的。笔者通过对绿原酸的含量测定，考察其配伍后含量有无降低来衡量热毒宁注射液加入到6种常用输液中的稳定性。
由于热毒宁注射液中绿原酸与栀子苷的性质有些相似，当流动相极性较大时，色谱峰叠加无法将两种物质分离开，造成测得的绿原酸含量比实际含量偏高，所以降低流动相的极性。但极性太低时，保留时间明显移后。实验中比较筛选了多种不同比例流动相体系，最后选定乙腈一水一冰醋酸(13：87：0.2)为流动相，流速为0.8 mL／min时。绿原酸的分离效果最好，保留时间适中。
参考文献
1 董晓莉，热毒宁注射液致过敏反应0例[J]，中国误诊学杂志，2009，19(7)：1528
2 国家药典委员会，中华人民共和国药典[M]，北京：化学工业出版社,2005：152—153
关键词 热毒宁注射液 绿原酸 稳定性 HPLC
中图分类号：R942 文献标识码：B 文章编号：1006—1533(2009)08-0373-03
热毒宁注射液是中成药注射剂复方剂型，由青蒿、金银花、栀子组成，不含动物药和矿物药，具有清热解毒、疏风解表的作用，临床用于上呼吸道感染(外感风热证)所致的高热、微恶风寒、头痛、咳嗽、痰黄等证。目前，热毒宁注射液广泛应用于临床，以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液和0.9％氯化钠注射液等常用输液稀释后静脉滴注给药。但笔者未见有关该液与各种输液配伍的稳定性研究的报道。笔者以配伍后混合溶液外观、pH值及注射液中的主要成分绿原酸为指标，考察了热毒宁注射液与5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、木糖醇注射液和缩合葡萄糖氯化钠注射液这6种常用输液中放置12 h后的配伍稳定性。
1 仪器与试药
1.1 仪器
美国Agilent HP1100系列高效液相色谱仪(Aglient G1310A单元泵，Aglient G1316A柱温箱，Aglient G1314A可变波长检测器，威马龙工作站)；隔膜真空泵(天津市腾达过滤器件厂)；10万分之一电子天平(Ohaus)；PHS－25数显pH计(上海精科雷磁仪器厂)；SD：3200超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)。
1.2 药品与试剂
绿原酸对照品(广西医科大学精制，批号：20071210)，纯度98.7％；热毒宁注射液(江苏康缘药业股份有限公司，规格：10 mL／支，批号：080601)；5％葡萄糖注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080807—104)，10％葡萄糖注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080806—101)，0.9％氯化钠注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080803103)，复方氯化钠注射液(武汉滨湖双鹤药业有限公司，批号：080528102)；木糖醇注射液(安徽环球药业股份有限公司，批号：A080107—9)；缩合葡萄糖氯化钠注射液(重庆大新药业股份有限公司，批号：08010004—1)；乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：T20070718)；甲醇、冰醋酸均为色谱纯；水为重蒸水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱SinoChrom ODS—AP(4.6 mm×250mm，5岬)，流动相：乙腈－水－冰醋酸(13：87：0.2)；流速：0.8mL／min；检测波长：327mm；柱温30℃；进样量20uL。
2.2 溶液配制
2.2.1 对照品溶液的配制
精密称取绿原酸对照品25.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用50％甲醇溶解并稀释至刻度，制成0.5mg／mL的对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的配制
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液10 mL分别加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化钠注射液(c)、复方氯化钠注射液(D)、木糖醇注射液(E)和缩合葡萄糖氯化钠注射液(F)250 mL中配成样品溶液，摇匀。精密吸取各样品溶液1mL，置10mL容量瓶中，用流动相稀释定容，即得。
2.2.3 阴性对照液的配制
按处方比例和配方，制得不含金银花的阴性对照样品。按2.2.2项下方法制成阴性对照液。
2.2.4 专属性实验
分别取绿原酸对照品溶液、各样品制成的供试品溶液和阴性对照液进样20uL测定色谱图。结果表明：阴性对照液中其它成分对样品的测定无干扰。
2.3 线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液适量，分别加流动相稀释至绿原酸10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100.ug／mL系列浓度，分别进样20汕进行测定，记录峰面积(A)，并以浓度(c，ug/mL)对吸收峰面积(A)作标准曲线，得线性方程为：A=6 521C-9.660 2(r=0.999 5)。结果表明，绿原酸在浓度范围10～100ug/mL内线性良好。
2.4 精密度试验
精密吸取绿原酸对照品溶液20uL，重复进样6次，测定绿原酸峰面积，计算绿原酸峰面积平均值为4 108 924，RSD为0.3％(n=6)。结果表明，仪器精密度良好。
2.5 重复性实验
将热毒宁注射液在5％葡萄糖注射液中的样品按照2.2.2项下供试品的配制方法，分别配制6份，测定绿原酸含量基本相同，RSD为0.2％，结果表明，本法重复性好。
2.6 加样回收率试验
精密取相同热毒宁注射液1 mL共6份，分别精密加入绿原酸对照品适量，按照2.2.2项下样品溶液的制备方法制得低、中、高这3种不同浓度的供试液，并按上述色谱条件测定峰面积并计算回收率。结果见表1，平均回收率为101.2％。RSD为1.3％(n=6)。
2.7 配伍稳定性考察
2.7.1 绿原酸的测定
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液10 mL分别加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化钠注射液(c)、复方氯化钠注射液(D)、木糖醇注射液(E)和缩合葡萄糖氯化钠注射液(F)各250mL中配成样品溶液，摇匀。于0、1、2、4、8、12 h精密吸取各样品液1 mL，用流动相稀释定容至10 mL，进样20uL，测定峰面积，计算绿原酸含量，结果见表2。
2.7.2 配伍溶液的制备与稳定性考察
按热毒宁注射液说明书的配制要求，将热毒宁注射液适量，分置于6个量瓶中，分别以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液、复方氯化钠注射液、木糖醇注射液和缩合葡萄糖氯化钠注射液稀释制成4％(mL／mL)的溶液，混匀，室温放置，于0、1、2、4、8、12 h作外观、pH值检查。
热毒宁注射液与6种输液配伍后，经室温放置，各配伍液未见明显变化，未出现沉淀、气泡等,pH值测定结果见表3。
3 讨论
热毒宁注射液与各输液配伍、室温放置，各配伍液绿原酸含量变化不显著，说明在上述实验条件下热毒宁注射液与6种常用输液配伍12 h内稳定性较好。
3.1 检测波长的选择
本品中含有绿原酸和桅子苷两个成分，《中华人民共和国药典》2005年版一部收载了单个组分的测定条件。紫外扫描结果表明，绿原酸在327mm波长处有较强的紫外吸收，故选定327 mm作为绿原酸的检测波长。
3.2 流动相的选择
金银花是热毒宁注射液的主要成分之一，绿原酸是金银花的主要有效成分，它的含量主要是以绿原酸的含量来计算的。笔者通过对绿原酸的含量测定，考察其配伍后含量有无降低来衡量热毒宁注射液加入到6种常用输液中的稳定性。
由于热毒宁注射液中绿原酸与栀子苷的性质有些相似，当流动相极性较大时，色谱峰叠加无法将两种物质分离开，造成测得的绿原酸含量比实际含量偏高，所以降低流动相的极性。但极性太低时，保留时间明显移后。实验中比较筛选了多种不同比例流动相体系，最后选定乙腈一水一冰醋酸(13：87：0.2)为流动相，流速为0.8 mL／min时。绿原酸的分离效果最好，保留时间适中。
参考文献
1 董晓莉，热毒宁注射液致过敏反应0例[J]，中国误诊学杂志，2009，19(7)：1528
2 国家药典委员会，中华人民共和国药典[M]，北京：化学工业出版社,2005：152—153