【摘 要】
：
目的构建具有良好组织相容性的CD31抗体耦联脾脏脱细胞支架，经内皮细胞再种植实现支架脉管系统预血管化。方法经脾动脉灌注1%曲拉通X-100(Triton X-100)/0.1%氨水制备大鼠脾脏脱细胞支架，苏木精-伊红(HE)染色和糖胺多糖(GAG)含量检测评价脱细胞效率，t检验分析脱细胞后DNA去除的效果。利用(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)将CD31抗体耦
【机 构】
：
上海同济大学附属第十人民医院腹部外科疑难诊治中心 200072,上海同济大学附属第十人民医院腹部外科疑难诊治中心 200072,南通市肿瘤医院肝胆外科 226361,上海同济大学附属第十人民医院腹部外
论文部分内容阅读
目的构建具有良好组织相容性的CD31抗体耦联脾脏脱细胞支架，经内皮细胞再种植实现支架脉管系统预血管化。
方法经脾动脉灌注1%曲拉通X-100(Triton X-100)/0.1%氨水制备大鼠脾脏脱细胞支架，苏木精-伊红(HE)染色和糖胺多糖(GAG)含量检测评价脱细胞效率，t检验分析脱细胞后DNA去除的效果。利用(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)将CD31抗体耦联到脾脏脱细胞支架，再种植人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。继续培养3 d后，免疫荧光检测评价细胞黏附。体内移植2周后，经HE染色、免疫组织化学染色，评价支架体内血管生长及组织相容性。
结果脾脏脱细胞支架HE染色未见明显细胞残留，脱细胞支架DNA含量[(43.26±5.14) ng/mg]较正常脾脏组织DNA含量[(5 896.00±393.90) ng/mg]明显减少(t＝14.860，P<0.05)。脱细胞支架GAG含量[(30.92±1.70) ng/mg]较正常脾脏组织GAG含量[(42.37±1.77) ng/mg]保留了70%以上。免疫荧光结果显示CD31成功结合到脱细胞支架中，且HUVECs定植于支架血管腔内，血管性血友病因子(vWF)呈阳性表达。支架体内移植2周后，HE染色、免疫组织化学结果显示CD31修饰脾脏脱细胞支架组血管生成数目明显多于未修饰组，且具有良好的组织相容性。
结论大鼠脾脏脱细胞支架保留了基本的脉管结构及细胞外基质成分，CD31耦联修饰的脾脏脱细胞支架支持HUVECs的定植生长，且体内具有促血管生成作用，具有良好的组织相容性。
其他文献
目的通过动物实验来验证腹腔镜下应用可降解、可示踪支架进行小肠吻合的安全性、可行性。方法纳入实验的32头实验猪(购自上海甲干生物科技有限公司)等额随机分配为两组：腹腔镜下小肠手工吻合对照组(C组)16头；腹腔镜下小肠支架吻合实验组(E组)16头。按分组进行小肠吻合手术，记录肠管吻合手术时间，术后14 d测量外周血检测白细胞计数和白蛋白水平，吻合口爆破压，吻合口组织羟脯氨酸含量和吻合口病理学情况。计量
目的比较吸烟与非吸烟颈椎病患者颈椎人工间盘置换术(CDR)治疗后的临床和影像学结果。方法分析2015年2月至2017年2月经CDR治疗的单节段或双节段颈椎病患者119例，最终纳入78例资料完整的患者。按照手术前6个月内是否吸烟，将所有患者分成吸烟组(27例)和非吸烟组(51例)。随访患者术前、术后的颈臂部疼痛视觉模拟量表(VAS)、颈椎活动障碍指数(NDI)、日本矫形协会量表(JOA)、Nuric
目的观察β受体阻滞剂对术后肠麻痹(POI)模型大鼠胃肠动力及炎性反应的影响。方法将24只SD大鼠(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)随机分为3组：对照组、POI组和β受体阻滞剂组，每组8只。POI组和β受体阻滞剂组大鼠开腹后暴露腹腔，但不进行任何手术操作，暴露3 h后关腹，建立POI模型；对照组大鼠仅作麻醉处理。β受体阻滞剂组大鼠分别于术前2 h和术后12 h给予5 mg/kg的酒石酸美托洛尔
目的探讨p53/微小RNA(miRNA，miR)-205/第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)信号通路在顺铂诱导急性肾损伤小鼠中的作用，减轻顺铂在三阴性乳腺癌中发挥抗肿瘤活性时产生的不良反应。方法30 mg/kg顺铂腹腔注射小鼠(购自江苏卡文斯实验动物中心)建立急性肾损伤模型。将18只雄性C57小鼠随机分为顺铂组、顺铂＋p53抑制剂组、对照组。检测每组小鼠血清肌酐(Cr)和
目的探讨川乌提取物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的影响及其机制。方法分别用2.5 g/L(AR 2.5 g/L组)、5.0 g/L(AR 5.0 g/L组)和7.5 g/L(AR 7.5 g/L组)川乌提取物处理HUVECs(购自中国科学院上海细胞库)，对照组(Con)未行川乌提取物处理。将微小RNA(miRNA，miR)-NC(miR-NC组)、miR-589(miR-589组)、
目的探讨静脉曲张的组织学和细胞学改变以及c-fos上调与血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转换的关系。方法2019年1月至6月纳入复旦大学附属华东医院31例静脉曲张患者(曲张静脉组)和12例冠状动脉搭桥术的患者(正常静脉组)纳入研究，采集大隐静脉进行实验。实时定量聚合酶链反应、免疫组织化学方法检测c-fos的表达。原代培养VSMCs采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和划痕法检测VSMCs的增殖和迁移
目的探讨血清、脂肪组织细胞色素P450芳香化酶(P450arom)表达与迟发型性腺功能减退症(LOH)之间的关系。方法对20个月龄雄性SD退役种鼠孤养建立LOH动物模型，症状评分及体能实验(悬尾试验、游泳实验)、性激素测定证实建模成功，同龄雄性健康大鼠作为对照组。测定各组大鼠内脏脂肪含量，电化学法检测各组大鼠血清性激素、血清、内脏脂肪组织P450arom浓度，并计算各组大鼠脂肪组织P450arom
目的观察沉默载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B(APOBEC3B)基因对胰腺癌细胞PATU8988(购自美国典型菌种保藏中心)细胞周期、增殖及侵袭能力的影响。方法通过构建重组靶向干扰APOBEC3B基因的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达质粒PGC-shRNA-APOBEC3B沉默APOBEC3B基因。分为空白对照组、阴性对照组及转染组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹
目的探讨椎间非融合椎弓根动态(K-Rod)固定系统治疗腰椎间盘突出症的短期临床效果。方法收集郑州大学第一附属医院2009年5月至2016年5月间因腰椎间盘突出症接受腰椎椎间非融合K-Rod固定系统治疗的患者79例，其中男51例，女28例，年龄范围为18～63岁，平均年龄40岁。手术节段：单节段59例(L2～L3 1例、L3～L4 4例、L4～L5 28例、L5～S1 26例)、双节段20例(L4～
目的探讨灯盏花素上调核因子相关因子-2(Nrf2)通路抑制大鼠液压冲击脑损伤后脑组织炎性损伤的具体机制。方法成年雄性SD大鼠36只(河北医科大学实验动物中心)，应用Dixon法制作颅脑损伤模型，造模后24 h用干湿重法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法和蛋白质印迹法(Western blot)分别测定脑组织含水量、炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及胞核N