【摘 要】
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目的 探讨大鼠创伤性脑损伤(TBI)后,采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导产生血管内皮祖细胞(EPCs)移植治疗大鼠TBI的作用,以及EPCs移植相对于BMSCs移植的优越性.方法 选取3个月
【机 构】
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300052,天津医科大学总医院放疗科天津市神经病学研究所, 天津医科大学总医院神经外科,300052;
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目的 探讨大鼠创伤性脑损伤(TBI)后,采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导产生血管内皮祖细胞(EPCs)移植治疗大鼠TBI的作用,以及EPCs移植相对于BMSCs移植的优越性.方法 选取3个月龄、体重约150 g雄性SD大鼠获取BMSCs,诱导培养EPCs,通过CD133、CD34及FLK-1的表达对EPCs进行鉴定.选取成年雌性SD大鼠120只,按随机概率表法分为EPCs组、BMSCs组和成纤维细胞(3T3)组,每组40只.液压冲击TBI装置制备大鼠中、重度TBI模型.伤后1d各组分别经尾静脉移植BrdU标记的EPCs、BMSCs或3T3细胞.移植后2,7,14,28 d采用改良神经严重度评分(mNSS)评估神经功能恢复程度,取损伤脑组织行免疫组化检测各组CD34、脑源性生长因子(BDNF)阳性细胞数,评估神经和血管再生情况.利用荧光免疫原位杂交(FISH)技术检测Sry基因阳性细胞数. 结果 CD133、CD34及FLK-1阳性率分别为52%、33%和38%,表明BMSCs是具有EPCs表型的细胞.移植7,14,28 d EPCs组mNSS为(10.2±1.5)分、(8.7±1.0)分、(4.9±1.0)分,BMSCs组为(10.8±1.7)分、(10.1±1.7)分、(7.2±1.3)分,均明显低于3T3组的(12.4±1.5)分、(11.7±1.8)分、(10.3±1.5)分(P<0.05).BrdU标记法结果显示,移植14,28 d EPCs组CD34、BDNF阳性细胞表达数EPCs组均明显高于BMSCs组(P<0.05),3T3组均未见CD34、BDNF阳性细胞表达.移植细胞示踪的Sry探针法比BrdU标记法显示的荧光阳性细胞数更多. 结论 BMSCs和EPCs经尾静脉移植后均可归巢至大鼠TBI处,EPCs治疗效果更好.
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