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目的 对BLAST推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的tls基因功能进行实验验证。方法 采用PCR方法从噬菌体PaP3基因组扩增出tls基因，克隆至pMDl8-T载体中，再经酶切纯化后将目的基因插入表达载体pQE31，转化入大肠杆菌JMl09，IPTG诱导表达目的蛋白，超声裂菌后收集包涵体，并用裂解缓冲液溶解包涵体蛋白。然后利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白，通过透析使H6-TLS复性。最后构建含有末端酶大亚基酶切位点的底物质粒pMD-cos，检测复性蛋白活性。结果 通过上述方法，成功构建了pQE-tls表达