糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞p53、bcl-2及生长因子的表达与细胞周期阻滞

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目的观察p53、bcl-2、bax基因、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I, IGF-I)及其受体在1~20周糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞(vascular endothelial cell, VECs)的表达以及与细胞周期阻滞的关系. 方法四氧嘧啶(alloxan)诱导制作糖尿病大鼠模型;免疫组织化学染色,光、电镜观察;斑点印迹(dot blotting)测定p53、bcl-2 mRNA;Western 印迹(Western blotting)测定p53、bcl-2蛋白. 结果免疫组织化学染色后光学显微镜观察显示8~20周糖尿病大鼠视网膜节细胞层、内核层的各类血管都呈p53、bcl-2免疫阳性反应.电镜观察显示阳性反应物沉淀在VECs.VECs同时为VEGF、bFGF、IGF-I蛋白及其受体阳性反应.视网膜内其它细胞及同窝对照大鼠和1~6周病程糖尿病大鼠视网膜所有细胞均未见上述蛋白阳性反应.Dot blotting测定结果显示,20周糖尿病大鼠视网膜组织有p53和bcl-2 mRNA表达.Western blotting测定证实20周糖尿病大鼠视网膜表达p53和bcl-2蛋白.对照组及1~20周糖尿病大鼠视网膜内未见bax阳性反应物. 结论 p53、bcl-2可能参与介导糖尿病大鼠视网膜VECs周期阻滞.高糖刺激生长因子VEGF、bFGF、IGF-I及其受体的表达,生长因子可能通过自分泌途径维持VECs存活.

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