【摘 要】
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基于网络药理学及急性肺损伤(acute lung injury,ALI)体外模型方法探索金荞麦及其主要活性成分治疗急性肺损伤的作用机制.通过TCMSP数据库,结合口服生物利用度、类药性作为限定条件获取金荞麦主要活性成分.检索PubChem数据库获得金荞麦活性成分相关靶蛋白,在GeneCards数据库收集与ALI相关靶基因,应用STRING 11.0构建化合物靶蛋白-ALI靶基因相互作用(PPI)网络,借助IPA生物网络分析平台对金荞麦潜在化合物靶蛋白与ALI靶基因共同作用的通路进行比较分析,预测金荞麦治疗
【机 构】
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宜春学院化学与生物工程学院,江西宜春336000;中国中医科学院中医临床基础医学研究所,北京100700;中国中医科学院中医临床基础医学研究所,北京100700;西北工业大学生命学院,陕西西安7100
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基于网络药理学及急性肺损伤(acute lung injury,ALI)体外模型方法探索金荞麦及其主要活性成分治疗急性肺损伤的作用机制.通过TCMSP数据库,结合口服生物利用度、类药性作为限定条件获取金荞麦主要活性成分.检索PubChem数据库获得金荞麦活性成分相关靶蛋白,在GeneCards数据库收集与ALI相关靶基因,应用STRING 11.0构建化合物靶蛋白-ALI靶基因相互作用(PPI)网络,借助IPA生物网络分析平台对金荞麦潜在化合物靶蛋白与ALI靶基因共同作用的通路进行比较分析,预测金荞麦治疗ALI的潜在关键靶点和信号通路.最后,通过金荞麦活性成分表儿茶素(epicatechin,EC)干预脂多糖诱导的RAW264.7细胞进行体外实验,对潜在关键靶点及通路进行验证.网络药理学结果显示,表儿茶素、原花青素B1、木犀草素等15种潜在活性成分可能通过RELA(P65)等关键靶点,作用于核因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路、腺苷酸激活蛋白激酶[adenosine 5\'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]信号通路等发挥治疗ALI作用.体外实验结果显示,25 μmol·L-1的EC与细胞共同培养24 h时与对照组相比细胞存活率差异无统计学意义,其发挥抗炎作用主要通过抑制NF-κB信号通路中p65磷酸化蛋白的表达水平,从而下调其下游促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、一氧化氮(nitric oxide,NO)表达,上调抑炎因子白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达.以上结果表明,金荞麦主要通过抑制NF-κB信号通路中p65蛋白的磷酸化,进而下调信号通路下游促炎细胞因子发挥治疗ALI作用.
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