【摘 要】
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采用淀粉平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板从选取的140株芽胞杆菌中初筛出8株具有产纤维素酶和淀粉酶复合酶芽胞杆菌,经酶活力测定解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754(Bacillus amylol
【机 构】
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福州大学生物科学与工程学院,福建省农业科学院农业生物资源研究所,福建农林大学生命科学学院
【基金项目】
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农业部公益性行业科研专项(201303094);国家国际合作项目(2012DFA31120);国家科技支撑计划项目(2012BAD14B15);国家自然科学基金(31370059)
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采用淀粉平板和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)平板从选取的140株芽胞杆菌中初筛出8株具有产纤维素酶和淀粉酶复合酶芽胞杆菌,经酶活力测定解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754(Bacillus amyloliquefaciens)具有较高的淀粉酶、纤维素酶活力。通过研究解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754的生长、产酶曲线以及酶学特性,确定在发酵28h后菌体生长进入稳定期,培养44h时发酵液中活菌数达到最大为4.41×109 cfu·mL-1,在36h时纤维素酶、淀粉酶均达到酶活最高峰,酶活分别为135.8、1 543.3U·mL-1;纤维素酶反应最适pH值为5.5、最适温度为50℃,Vmax为5.14×10-3 mg·mL-1·min-1、Km值为7.71×10-1 mg·mL-1;淀粉酶反应最适pH值为5.5、最适温度为55℃,Vmax为3.35×10-2 mg·mL-1·min-1、Km值为6.03×10-3 mg·mL-1。采用3因素7水平,即U7(73)均匀设计法优化解淀粉芽胞杆菌产酶条件,确定产纤维素酶、淀粉酶的最优条件均为:初始pH值6.2、培养温度37.5℃、转速180r·min-1,优化后解淀粉芽胞杆菌FJAT-8754纤维素酶活力为202.9U·mL-1、淀粉酶活力为2 392.9U·mL-1。
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