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GFP(green fluorescent protein)是一种用于检测细胞的基因表达和蛋白定位的报告基因,pLenti6/V5-D—TOPO是高效的慢病毒类表达载体。实验利用PCR(polymerase chain reaction)从质粒pEGFP—N1中扩增了EGFP基因片段,再利用高效、快速、定向的TOPO克隆法将扩增片段克隆到pLenti6/V5-D—TOPO载体中,构建了既能高效转染细胞又能方便观察蛋白表达情况的pLEGFP重组载体。通过PCR法鉴定及瞬时转染,结果显示,GFP基因正确地插入