Ca-Alg作为OPG缓释载体的实验研究

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目的本实验以藻酸钙(calcium alginate,Ca-Alg)凝胶为载体将护骨素(osteoprotegerin,OPG)与羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)复合构建OPG/Ca-Alg/HA复合材料,筛选出OPG缓释效果最稳定的OPG/Ca-Alg/HA复合材料,体外研究该材料缓释的OPG对体外培养破骨细胞的形态及功能影响,并进一步研究其植入兔下颌骨缺损后骨缺损的修复的效果。方法通过ELISA法检测检测OPG蛋白释放速率并筛选OPG缓释效果最稳定的OPG/Ca-Alg/HA复合材料;将该材料与兔破骨细胞在体外共培养,抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞形态与功能;体内植入兔下颌骨缺损,通过影像学和组织学方法评估术后8周标本的成骨效果。结果 1.5%藻酸钠溶液和100mmol/L氯化钙溶液配比的OPG/Ca-Alg/HA复合材料能以较平稳的速度释放OPG。OPG/Ca-Alg/HA复合材料与兔破骨细胞共培养后破骨细胞的伪足收缩,细胞核固缩,胞质内出现广泛空泡样变性,形成的骨陷窝面积减小。OPG/Ca-Alg/HA实验组与缺损部位骨组织结合紧密,无明显松动,HA-骨界面有明显成骨,新生骨质致密;对照组材料与缺损部位骨组织结合良好,部分标本有松动,HA-骨界面新生骨量少且疏松。结论 Ca-Alg作为OPG缓释载体,在1.5%藻酸钠溶液和100mmol/L氯化钙溶液配比下具有较好的缓释作用;其释放的OPG可以在体外实验中抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能,在体内实验中,缓释OPG可以促进Ca-Alg/HA材料周围骨再生。
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