乙醇抑制大鼠原代肝细胞中P70S6K和ERK1/2活性

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目的研究乙醇对原代肝细胞中P70S6K和ERK1/2活性的影响。方法分离成年雄性SD大鼠的肝细胞,分别以0、50、100和200 mmol/L的乙醇处理4 h,或以200 mmol/L乙醇处理0、1、2和4 h,用Western blot法检测P70S6K和ERK1/2的活性。在细胞中加入100 nmol/L的mTOR特异抑制剂雷帕霉素或10μmol/L的MEK1/2特异抑制剂U0126,培养24 h后收集细胞,用Western blot法检测P70S6K、ERK1/2及PPARγ的表达;用EMSA检测PPARγ的活性。结果随着乙醇浓度的增加或处理时间的延长,P70S6K的表达逐渐降低;乙醇也可抑制ERK1/2的活性;U0126同时抑制ERK1/2和P70S6K的活性,而雷帕霉素虽抑制P70S6K的活性,但增强ERK1/2的活性;乙醇不影响PPARγ的表达和活性。结论在大鼠原代肝细胞,乙醇对P70S6K的活性有抑制作用,且存在量效关系和时效关系。P70S6K的活性受ERK1/2的控制,但P70S6K也可反向调节ERK1/2。
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