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目的
构建猪带绦虫重组非分泌型pMG36e-TSOL18/L.lactis和分泌型pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis疫苗。
方法以GenBank中登录的猪带绦虫TSOL18基因序列为模板，以乳酸菌为宿主系统进行基因优化，采用基于PCR的精确合成（PAS）方法，设计引物，在其两端分别加入酶切位点Sac I/Hind Ⅲ以及保护性碱基，在其N端添加SPUSP45分泌信号肽序列，分别合成TSOL18和SP-TSOL18目的基因。将目的基因克隆至大肠埃希菌-乳球菌穿梭表达质粒pMG36e，构建胞内型表达载体pMG36e-TSOL18和分泌型表达载体pMG36e-SP-TSOL18，进行测序和酶切鉴定；采用电穿孔转化法将两种重组质粒转化至乳酸乳球菌（L.lactis）MG1363，构建猪带绦虫重组pMG36e-TSOL18/L.lactis和pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis疫苗，并进行PCR鉴定。
结果经Sac I和Hind Ⅲ双酶切，获得了相应的TSOL18基因片段和pMG36e载体片段，与预期结果相符；与TSOL18基因标准序列作比对，匹配度均为100%，均插入到pMG36e载体的Sac I和Hind Ⅲ中。重组pMG36e-TSOL18/L.lactis和pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis的PCR结果均可见393 bp的基因片段产物。
结论成功构建了猪带绦虫重组pMG36e-TSOL18/L.lactis和pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis疫苗。