【摘 要】
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目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)检测大肠杆菌DNA的方法,评估临床标本检测效果.方法 选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物和探针,采用High Pure PCR Templa
【基金项目】
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卫生部临床学科重点项目基金(20010103)、北京市联合攻关项目基金(2002-1024).
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目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)检测大肠杆菌DNA的方法,评估临床标本检测效果.方法 选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物和探针,采用High Pure PCR Template Preparation Kit提取基因组DNA,建立20μl TaqMan探针RQ-PCR反应体系.对26份外科发热患者标本(血标本20份,腹腔引流液3份,胸水2份,胆汁1份)进行荧光RQ-PCR检测.结果 引物和探针特异性好,标准曲线相关系数在0.991~0.999之间.在最低检测限(102拷贝/反
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