防御素5和LL37真核重组质粒构建及转染人阴道上皮细胞的研究

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目的:构建防御素5(HD5)和LL37的真核重组质粒并瞬时转染人阴道上皮细胞,以期探讨阴道上皮细胞抵抗微生物感染的机制。方法:(1)从人阴道上皮细胞中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)扩增出HD5和LL37的cDNA,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+)-EGFP中,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/HD5-EGFP和DcDNA3.1(+)/LL37-EGFP。(2)经组织块法原代培养人阴道上皮细胞并传代,将2种质粒分别或联合转染人阴道上皮细胞,转染6、12、24和48h后,采
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