重组人巨细胞病毒的转染、培养及其表型鉴定

来源 :现代预防医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snake916
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]对重组人巨细胞病毒进行体外包装培养并鉴定,为该病毒基因组功能研究提供稳定的实验材料。[方法]用试剂盒抽提、纯化重组人巨细胞病毒Towne基因组(Towne-BAC),构建pcDNA3.1(+)-UL82表达质粒;将Towne-BAC与pcDNA3.1(+)-UL82共转人胚肺成纤维细胞;培养病毒、观察细胞病变,抽提病毒RNA;设计人巨细胞病毒IE1、UL138、UL145基因PCR引物并扩增序列,电泳鉴定。[结果]成功构建pcDNA3.1(+)-UL82,Towne-BAC与pcDNA3.1(+)-UL82共转后发生细胞病变;重组病毒的细胞培养物中分别检测到IE1、UL145基因表达,无UL138基因表达。[结论]成功包装出重组人巨细胞病毒,表型与Towne株吻合。 [Objective] The recombinant human cytomegalovirus (HCMV) was cultured in vitro and identified, which provided a stable experimental material for the study of the genomic function of the virus. [Method] The Towne-BAC of Tow cells was extracted and purified by using the kit to construct the pcDNA3.1 (+) - UL82 expression plasmid. Towne-BAC was co-transfected with pcDNA3.1 (+) - UL82 Human embryo lung fibroblasts were cultured, the virus was observed, the cytopathic effect was observed and the viral RNA was extracted. The PCR primers of human cytomegalovirus IE1, UL138 and UL145 were designed and amplified by PCR. [Results] The cytopathic effect of co-transfected with pcDNA3.1 (+) - UL82, Towne-BAC and pcDNA3.1 (+) - UL82 resulted in the expression of IE1 and UL145 gene in the cell culture of recombinant virus UL138 gene expression. [Conclusion] The recombinant human cytomegalovirus was successfully packaged and its phenotype was consistent with Towne strain.
其他文献
万艾可?是治疗勃起功能障碍(ED)的一线药物,随着该药越来越广泛的应用,其治疗的安全性也越来越受到医生和患者的重视。曾有报告患者在使用万艾可?时出现了短暂且轻微的视觉变
Three new diterpenoids, gesneroidins D-F (1-3), were isolated from Isodon gesneroides.The structure was determined as 3β, 7β, 11β, 15β-tetraacetoxy-ent-kaur
期刊
给出尚未出现在JCPDS-PDF上的HoNi2Ge2相的X射线粉末衍射数据。该化合物属四方晶系,空间群为I4/mmm,a=4.0303(1),c=9.7745(4)。每个晶胞中有2个化合式量。衍射数据指标化可靠性因子F29=54.6(0.009357)。 X-ray powder diffraction data of the
我们近来收治晚发性维生素K 缺乏所致婴儿颅内出血94例,其中男63例,女31例,年龄23天~6个月,75例母乳喂养,6例人工喂养,13例混合喂养,其中发热45例,体温不升1例,呕吐37例,抽搐
国务委员吴仪: 中国将采取发行股票、项目融资、BOT等方式拓展利用外资渠道。中国对外开放将进入新阶段,即由有限范围到全方位的开放,由试点性开放到法律框架下的可预见性开
日子越是好过,过得越快。转眼,我老伴白俊英也成了耄耋老人。她八十大寿那天,我们全家四代人为她举办了简朴而温馨的寿宴,表达我们对她的祝贺之情。孙子端上蛋糕,点燃蜡烛,全
哲人说:理想在任何时候付诸行动都不晚。因此看到老妈每天那么认真地对着五线谱一个音符一个音符地摸索,我心中暗暗佩服。  老妈学弹琴最初并非是她主观所愿。  女儿六岁开始学弹琴。开始,我天天陪女儿去上琴课,认识了每一个音符在五线谱上和钢琴键盘上的位置,以便帮助女儿理解学习一些较难的曲子。但我是高三教师,到了高考冲刺前,工作变得非常忙碌,陪女儿上琴课不得不三天打鱼两天晒网了。单独上完课回家的女儿常常不是
寄生隐丛赤壳菌Cryphonectria parasitica菌株经液体培养,石油醚萃取其发酵液获得对板栗带叶嫩枝具有致萎活性的粗提物,以氯仿:石油醚:甲醇(6:2:2)作洗脱剂,粗提物经硅胶色谱
截至2000年底,辉县市共有个体工商户15900户,私营企业1263家,出口创汇2898万元,完成工商税收3933万元。个体私营经济作为一个新的经济增长点,为振兴和繁荣辉县市经济,促进两个文明建设发挥了重要作用。辉
作者报告1例11个月龄的女婴,腹泻和呕吐已有5个月,入院前5天症状加剧。检查发现患儿营养不良,脱水和面色苍白,无浮肿、黄疸和皮疹,呼吸与心血管系统正常。实验室检查,白细胞