【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA1)在转化生长因子β(TGF-p)介导的胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)中的作用机制.方法 用10 ng/mL人重组TGH-β1处理胃
【机 构】
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321000浙江,金华市人民医院消化内科
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目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA1)在转化生长因子β(TGF-p)介导的胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)中的作用机制.方法 用10 ng/mL人重组TGH-β1处理胃癌细胞系MNK-45及SGC-7901,Transwell实验检测细胞侵袭能力,荧光定量PCR检测Slug、锌指E盒结合同源框1(ZEB1)、波形蛋白和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平;用TGF-β处理细胞后转染lncRNA UCA1小干扰RNA(siUCA1),检测上述指标.在MNK-45细胞中转染微小RNA-204 (miR-204)模拟物、miR-204模拟物+lncRNA UCA1过表达质粒5 ng、miR-204模拟物+ lncRNA UCA1过表达质粒10ng后,检测ZEB1的表达水平.用TGF-β、TGF-β+ miR-204模拟物、TGF-β+rmiR-204模拟物+lncRNA UCA1过表达质粒处理MNK-45细胞,检测Slug、ZEB1、波形蛋白和E-cadherin的表达水平.结果 与对照组比较,TGF-β处理组穿膜细胞数增多,Slug、ZEB、波形蛋白和lncRNA UCA1表达增加,E-cadherin表达减少(P＜0.01).与TGF-β处理组比较,TGF-β+siUCA1组穿膜细胞数减少,Slug、ZEB1、波形蛋白表达减少,E-cadherin表达增加(P＜0.01).转染miR-204模拟物后可抑制ZEB1的表达(P＜0.01),同时转染lncRNA UCA1过表达质粒(5 ng和10 ng)后,对ZEB1的抑制作用消失.与TGF-p处理组比较,TGF-β+ miR-204模拟物组Slug、ZEB1和波形蛋白表达减少,E-cadherin表达增加(P＜0.01),而同时转染lncRNA UCA1过表达质粒(5 ng)后,可阻断TGF-β+ miR-204模拟物的作用(P＜0.01).结论 LncRNA UCA1能够通过miR-204/ZEB1影响TGF-β对胃癌细胞EMT的促进作用.
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