目的筛选可用于CV-A16疫苗免疫原性评价的最适实验动物及中和抗体检测毒株,为构建CVA16疫苗免疫原性评价方法提供依据。方法采用CV-A16灭活疫苗免疫6种实验室常用动物BALB/c、ICR、NIH、KM鼠、豚鼠、SD大鼠以及对肠道病毒敏感的SCARB2-转基因小鼠和沙鼠,于一针和两针免疫后采血,分别用B基因型ZJ31/02、ZJ90/02、ZJ20/01毒株和A基因型原型株(G10)作为检测毒株进行CV-A16中和抗体应答水平研究。结果一针免疫后,全部组别的中和抗体应答水平均较低,ZJ31/02、ZJ90/02、ZJ20/01和G10检测的NTAb阳转率均值分别为51.3%(0～80%)、40.0%(0～70%)、12.5%(0～20%)和5.0%(0～20%);二针免疫后,抗体水平出现明显升高,阳转率均值分别为95.0%(80%～100%)、88.8%(70%～100%)、58.8%(0～100%)和65.0%(0～90%);GMTs均值分别为55.5、46.4、20.2和11.7。以ZJ31/02和ZJ90/02的检测结果最高,阳转率显著高于ZJ20/01 (P<0.05)。采用该两检测株检测时,KM鼠和SD大鼠的抗体应答最强,阳转率均可达90%,GMTs均高于100。结论CV-A16灭活疫苗二针免疫KM小鼠和SD大鼠可诱导较好的特异性中和抗体应答,可将ZJ31/02和ZJ90/02作为检测毒株,结合标准物质建立标准化CV-A16疫苗体内效力和免疫原性评价方法。