还精煎延缓衰老的实验研究(二)——对老年小鼠肺、肝组织中环核苷酸的影响

来源 :上海中医药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangjiejin
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<正> 材料和方法一、实验动物,喂药方法及分组情况见前。二、组织样品的制备:用扭力天平分别称取各组小鼠肺、肝组织100mg左右,立即放入盛有1 ml预冷的5%三氯醋酸的玻璃匀浆器中,冷冻匀浆3~5分钟,倒入离心管中,再取1 ml 5%三氯醋酸加入匀浆器中,洗净残留物,合并倒入离心管,0℃3000rpm 10分钟,弃沉淀,上清液转移到磨口离心管中,加入三倍体积的水饱和乙醚,反复抽提3次,弃上层乙醚液,下层液倒入小烧杯(或青霉素瓶)中,65℃水浴中氮气或压缩空气吹干备用。测量时,将吹干样品加入2ml 50mM pH4.75醋酸缓冲液使之溶解,取0.1ml加入反应管中测量,计算样品含量。三、测量方法:以本室自制抗cAMP、抗cGMP抗血清,采用改进了的3H—cAMP[3]及125I-cGMP放射免疫分析法(RIA),测定样品中cAMP和cGMP含量,均以Pmol/mg组织湿重表示。
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