【摘 要】
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为建立稳定表达结核分枝杆菌分泌蛋白MTP64的P815细胞系,将mpt64基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1（-）,构建mpt64真核表达载体。重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipofectamine2000转染
【机 构】
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第四军医大学基础部微生物学教研室,第四军医大学基础部微生物学教研室基础部教学实验中心,第四军医大学基础部微生物学教研室西京医院放疗科,第四军医大学基础部微生物学教研室西京医院检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金（30500432）资助
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为建立稳定表达结核分枝杆菌分泌蛋白MTP64的P815细胞系,将mpt64基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1（-）,构建mpt64真核表达载体。重组质粒酶切鉴定正确后,以Lipofectamine2000转染P815细胞,通过G418筛选后,得到阳性克隆,分别以RT-PCR方法检测mRNA表达,间接免疫荧光和Western-blot检测目的蛋白的表达。表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64的真核表达载体转染细胞后,RT-PCR可扩增出目的基因片段,转染细胞间接免疫荧光检测阳性,Western-blot检测
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