【摘 要】
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目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人骨肉瘤细胞143B的抑制作用,并初步探讨其可能的分子机制。方法:分别用0~50μmol/L的EGCG处理骨肉
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院骨科儿童发育疾病研究教育部重点研究室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆重点实验室,
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目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人骨肉瘤细胞143B的抑制作用,并初步探讨其可能的分子机制。方法:分别用0~50μmol/L的EGCG处理骨肉瘤143B细胞,然后采用结晶紫染色法观察细胞增殖能力的变化,Hoechst染色法分析细胞凋亡情况,细胞划痕愈合实验和Transwell小室法分析细胞迁移能力,蛋白质印迹法检测细胞凋亡及迁移相关蛋白的表达水平。同时,采用荧光素酶报告基因系统分析细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活化情况,再用蛋白质印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路中关键因子β-catenin及其下游靶分子c-Myc和cyclin D1的表达情况。结果:EGCG处理后,骨肉瘤143B细胞的增殖和迁移能力均受到明显抑制(P值均<0.05),而晚期凋亡细胞数明显增加(P<0.05);细胞中凋亡蛋白caspase-3及其剪切体的表达水平均明显上调(P值均<0.05),而Bcl-2、金属基质蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、β-catenin、c-Myc和cyclin D1的蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.05)。此外,EGCG处理组的荧光素酶活性较未处理组明显下降(P<0.05)。结论:EGCG能抑制骨肉瘤143B细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡;这一作用可能与其阻断Wnt/β-catenin信号通路有关。
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