【摘 要】
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通过PCR扩增出洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1脂肪酶基因,将基因片段分别克隆到大肠杆菌、毕赤酵母和枯草杆菌的表达载体,转入表达菌株中。结果表明,重组脂肪酶在大肠杆菌中主要以
【机 构】
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山东理工大学农业工程与食品科学学院,山东农业大学林学院,滕州市农业局
【基金项目】
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中国博士后科学研究基金项目（2015T80735,2013M531641）.
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通过PCR扩增出洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1脂肪酶基因,将基因片段分别克隆到大肠杆菌、毕赤酵母和枯草杆菌的表达载体,转入表达菌株中。结果表明,重组脂肪酶在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,在毕赤酵母中未有表达,而在枯草杆菌中实现了胞外分泌表达,测得发酵上清液酶活为13.8 U/mL。对重组枯草杆菌发酵条件进行了摇瓶初步优化和3 L的反应器分批培养。当以TB为出发培养基,初始pH 6.5,温度为37℃时,在3L的发酵罐上最终酶活达到34.5 U/mL,是野生菌表达量的4.2倍。
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