马传染性贫血病毒N-连接糖基化回复突变的感染性克隆构建

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：castchen

【摘要】

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根据马传贫强毒株EIAV-L和疫苗株EIAV-FDD表面蛋白gp90的N-连接糖基化的变化规律，采用PCR定点突变的方法，对全长感染性克隆pLGFD3-8上的N-连接糖基化的差异区域进行改造后，构建

【作者】

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韩秀娥全滟平高旭相文华周建华

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

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马传染性贫血病毒 N-连接糖基化定点突变感染性克隆 equine infectious anemia virus （EIAV） N-glycosylatio

【基金项目】

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国家“973项目”（2001CCA00600）,黑龙江省发展高新技术产业专项资金项目（FW058007）

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根据马传贫强毒株EIAV-L和疫苗株EIAV-FDD表面蛋白gp90的N-连接糖基化的变化规律，采用PCR定点突变的方法，对全长感染性克隆pLGFD3-8上的N-连接糖基化的差异区域进行改造后，构建成含有3个N-连接糖基化位点突变的感染性克隆pLGN191N236N246。将其转染驴胎皮肤细胞（FDD），通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性。结果表明，在FDD细胞中盲传三代后，在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性，RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性，电镜下见到典型的EIA

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