【摘 要】
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目的：探讨美洲大蠊提取物（PAS840）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法：采用H2O2刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型，实验分为正常组（Con）、模型组（Mod）、PAS840低中高剂量组(20，50，125 μg·mL-1的PAS840培养基溶液进行处理)，采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率，生化试剂盒检测各组超氧化物歧
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：82060747）；
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目的：探讨美洲大蠊提取物（PAS840）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法：采用H2O2刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型，实验分为正常组（Con）、模型组（Mod）、PAS840低中高剂量组(20，50，125 μg·mL-1的PAS840培养基溶液进行处理)，采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率，生化试剂盒检测各组超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的水平；DCFH-DA荧光探针检测各组活性氧（ROS）的水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；JC-1法染色检测各组细胞线粒体膜电位（MMP）；RT-qPCR检测各组Nrf2/HO-1通路因子（Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1）、凋亡因子（Bcl-2、Bax和Caspase-3）、炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）、乙酰胆碱酯酶（AchE）和过氧化氢酶（CAT）mRNA的表达水平；Western blot法检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平。结果：PAS840可显著提高氧化损伤细胞的存活率、MMP及SOD、GSH-Px和GSH的水平，降低LDH、MDA和ROS的水平；显著降低Keap1、TNF-α、IL-1β、IL-6和AchE mRNA表达的同时，显著增加CAT和NQO1 mRNA的表达，显著降低Nrf2、Bax和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达，显著增加HO-1和Bcl-2的mRNA及其蛋白表达。结论：PAS840可以抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡，减轻炎症，其机制可能与降低ROS，调控Nrf2/HO-1通路因子减轻细胞的氧化损伤程度有关。
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