【摘 要】
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本试验是从疑似猪圆环病毒Porcine circovirus(PCV)病的猪体中分离病料,提取DNA,应用PCR扩增及蛋白提纯技术,并以提取的Cap(PCV2-rCaP)蛋白作为免疫原,经纯化后,制备疫苗,对B
【机 构】
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吉林农业科技学院动物科技学院,吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心,吉林省九台区畜牧总站
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本试验是从疑似猪圆环病毒Porcine circovirus(PCV)病的猪体中分离病料,提取DNA,应用PCR扩增及蛋白提纯技术,并以提取的Cap(PCV2-rCaP)蛋白作为免疫原,经纯化后,制备疫苗,对Balb/c系小鼠进行免疫,并将血清检测阳性鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按5:1的比例融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA法)和有限稀释法进行单克隆杂交瘤细胞的筛选,建立了单克隆抗体的辁测方法,最佳反应条件为:单克隆抗体的包被浓度为1:600,抗体的工作浓度为1:16倍.用阳性细胞株诱导制备腹水抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)等病进行交叉反应检测均为阴性,本抗体显示出良好的特异性.结果获得了稳定分泌抗猪圆环病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株CaP-Mab.为防治猪Ⅱ型圆环病毒病提供了有效方法.
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