目的:建立简便快速、灵敏准确的超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人体血浆利多卡因及其两种活性代谢物的浓度。方法:血浆样品经溶剂诱导相变萃取前处理后,以罗哌卡因为内标,经Thermo hypersil GOLD C18(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱,以A(0.01%甲酸水溶液)-B(乙腈)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),在正离子(positive)模式下进行选择离子反应监测(SRM)。结果:利多卡因在5~4 000 ng·mL-1范围内线性关系良好,单乙基甘氨酰二甲苯胺、甘氨二甲基苯酰胺在1~800 ng·mL-1范围内线性关系良好。该方法日内、日间RSD均小于10%,且提取回收率稳定,并测得股神经联合坐骨神经阻滞后,10名足踝手术患者体内利多卡因及两种活性代谢物的Cmax分别为(1 672.86±227.45)、(265.66±32.71)、(42.19±22.35)ng·mL-1。结论:该方法简便高效、灵敏准确,可用于利多卡因及其两种活性代谢物血药浓度的监测。