【摘 要】
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蝎体内产生一系列毒素蛋白，ANEPⅢ是其中一种。试验构建重组表达载体pPIC9K-ANEPⅢ，将质粒pNJUTRXA-ANEPⅢ转化大肠杆菌BL21，通过IPTG诱导目标蛋白ANEPⅢ，并用Tricine-SDS-PAGE电
【基金项目】
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国家林业局“948”项目(2014-4-02)
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蝎体内产生一系列毒素蛋白，ANEPⅢ是其中一种。试验构建重组表达载体pPIC9K-ANEPⅢ，将质粒pNJUTRXA-ANEPⅢ转化大肠杆菌BL21，通过IPTG诱导目标蛋白ANEPⅢ，并用Tricine-SDS-PAGE电泳进行定性分析，检测得到8000 kD目的蛋白。通过电转化的方法将pPIC9K-ANEPⅢ转入毕赤酵母宿主菌GS115中，筛选得到一株耐受2.0 mg/mL G418表型为His＋Mut＋的菌株。经0.5%的甲醇诱导，取不同诱导时间的表达上清液进行Tricine-SDS-PAGE电泳分
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