【摘 要】
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目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1（cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1）含量的化学发光微粒子免疫检测方法（chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA）。方法原核表达制备重组CY21-1（r CY21-1）,用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融
【机 构】
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厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院
【基金项目】
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福建省科技重大专项（2015Y0051,2011YZ0002-1）； 厦门市科技计划项目（3502Z20120008）；
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目的建立细胞角蛋白19片段抗原21-1（cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1,简称CY21-1）含量的化学发光微粒子免疫检测方法（chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA）。方法原核表达制备重组CY21-1（r CY21-1）,用其免疫BALB/c小鼠后,收集小鼠脾脏细胞,常规杂交瘤技术与Sp2/0进行融合,制备CY21-1单抗。间接ELISA法筛选可稳定分泌CY21-1抗体的杂交瘤细胞,分别标记微性磁珠（magnetic beads,MB）和吖啶酯（acridinium ester,AE）,筛选可特异检测CY21-1的单抗配对,建立CY21-1 CMIA,同时验证方法的线性及灵敏度,并与同类试剂盒进行比较。结果经筛选获得了一组能特异检测CY21-1的单抗配对MB*26B5-3E4*AE,建立的CY21-1 CMIA对检测CY21-1校准品的线性范围为0.1~1 000 ng/m L,R~2=0.992 3,检测灵敏度为0.076 ng/m L。该方法与美国雅培公司生产的Abbott CY21-1 CMIA诊断试剂盒平行检测250份临床血清标本的结果具有良好的相关性（R~2=0.961 6）。结论成功建立了CY21-1 CMIA,且具有良好的线性及灵敏度,为我国肺癌的临床筛查和早期诊断奠定了基础。
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