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摘 要:养心口服液中主要包含九种药材成分,分别是五味子、丹参、黄芪、人参、川芎、柏子仁、甘草、山楂以及当归。在原有质量标准校验的基础上,同时对人参、甘草以及黄芪采用薄层鉴别的方法进行研究,结果显示要比原有的质量标准高出很多,并且更加的便捷,具有较强的专属性,希望在本文的论述下可以对今后的工作带来一定的帮助。
关键词:养心口服液;人参;黄芪;甘草;质量标准;薄层层析
养心口服液主要是治疗心气不足的一种药物,在呼吸急促时可以使用,并且对于心悸怔忡以及舌淡脉弱等一些症状具有显著的治疗效果,在临床验证的情况下,可以证实这种药品对于心肌炎的治疗具有十分显著的效果,该药物是由黑龙江某中药医学院进行研制的,并且由哈尔滨某制药公司所生产,在进行质量标准检验的过程中,主要采用了薄层条件,并且按照不同的条件要求对人参、当归以及川穹进行了鉴别,在使用方法方面还存在一定的难度,并且有时存在不灵敏性,同时也没有对专属性进行有效的鉴别,因此需要对原有方法加以进一步的改进,并且在改进的基础上,可以在同一硅胶板上将人参、黄芪以及甘草得到鉴定,具有十分理想的效果,所以希望在本文的基础上可以得到进一步的推广。
1 试剂药品
本次试剂药品主要由四个部分组成,一个是硅胶G薄板,由某化工厂生产,本试验中应用的所有试剂均为分析纯,三是在试验中所需要的养心口服液,由某制药公司提供,均为统一批号下的产品,最后选择了对照品人参皂甙Rg1、黄芪甲甙及甘草对照药材,上述对照药材的提供者为中国药品生物制品鉴定所。
2 质量控制方法的研究
2.1 定性鉴别
首先需要进行定性鉴别,在对人参进行定性鉴别的过程中,先是取样品以及缺少人参的阴性对照液5ml,将其放入过氧化铝柱以及70%浓度的乙醇中进行洗脱,在洗脱完成后将其放在水浴中进行蒸干处理,取适量的正丁醇,在水饱和的前提下将其进一步的溶解,并且转移到分液漏斗中,提取2ml的甲醇准备后续使用,并且取适量的人参药材,将其放在70%的乙醇中进行回流,经过1h后取出,经过过滤以后,再将滤液按照上述方法进行回收,取适量的人参皂贰Rg1对照液,放在同一个硅胶G板上,将氯仿、甲醇以及水按照一定的比例展开13cm,将其晾干以后喷洒适量的磷铂酸甲醇液,用电吹风吹干后直到显色,将其放在日光下进行检视,将供试品色谱和对照品色谱进行对应,其中有蓝色斑点的显示。
五味子的薄层鉴别:取样品5ml与氯仿10ml水浴回流提取30min,取氯仿层挥干,再用氯仿2ml溶解备用,另取五味子药材及处方量阴性空白药材以氯仿回流提取1h,过滤,滤液挥干,再以氯仿溶解点于同一硅胶G板上,以石油醚一甲酸甲醋一甲醇(15:5:1)展开10cm,取出晾干,用10%的磷钼酸甲醇液显色,电吹风吹至斑点显色清晰,日光下检视,供试品与对照品有相对应的蓝色特征斑点。
麦冬的薄层鉴别:取5ml样品液加人0.5ml盐酸、10ml水共煮沸5min,放冷,氯仿20ml萃取,取氯仿层浓缩至2ml备用,取麦冬药材及处方量的阴性对照品水提10min,滤液重复上面操作,各试液点于同一硅胶G板上,以氯仿-丙酮(4:1)展开10cm,取出晾干,喷以10%的硫酸乙醇液,105℃烘至显色清晰,日光下检视,供试品与对照品有相对应的墨绿色斑点。
2.2 含量测定
首先对供试液进行制备,先取适量的样品0.5ml,将其进行洗脱以及收集,在水浴中蒸干以后,使用水饱和的正丁醇进行溶解,再将其转至分离漏斗中,使用正丁醇分别清洗两次,一次使用氢氧化钠溶液进行清洗,一次是用正丁醇饱和盐酸液进行清洗,再分别萃取两次,采用水饱和的正丁醇,在将其合并以后,在水浴中蒸干,使用甲醇进行定容,将其置于10ml的量瓶中准备后续的使用。
紧接着要对阴性对照液进行制备,先取适量的药材,将其按照样品的制作工艺进行制作,制成缺少人参的阴性对照液,将其放入0.5ml的氧化铝柱中进行过滤,按照样品的制备过程进行制备,最终获得阴性对照液。
标准液的制备:取适量的人参皂贰Rg1对照品,加甲醇制成48μg/ml的溶液作对照品溶液。
测定波长组的选择:取一定量的人参皂贰Rg1对照品溶液、供试品及自配处方量阴性空白对照液显色,在400-600nm范围内扫描,对照品与供试品在540nm处有最大吸收,故以540nm为测定波长,另取不同量的三份阴性对照液,以0.5nm间隔的波段找出相应的等吸收点为495nm.即为参比波长。
标准曲线的绘制:精密称取12mg人参皂贰Rg1、于250ml容量瓶中,甲醇定容,摇匀,即得48拌g/ml的标准液。分别吸取0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.4ml标准品液于5ml量瓶中.水浴蒸干,加入2%的香草醛一硫酸液(70%)至刻度,摇匀,60℃水浴中加热15min后取出立即置冰浴中冷却,以0管为空白对照,在540,495nm波长处测定吸收度,求出△A值,结果表明,△A与C符合朗伯一比尔定律,回归方程为:C=61.26417△A-0.44024,r=0.9999。
稳定性实验:取一定量的样品液,按标准曲线项下操作显色依法测定,每隔5min测1次,结果表明吸收度在30min内稳定。
回收率实验:取一定量的人参皂苷Rg1,对照液,准确加入已知浓度的样品液中,按样品液制备项下操作,依法测定计算回收率,结果得平均回收率为100.5%,RSD=1.03%。
样品含量测定:取样品0.5ml过中性氧化铝柱,以下同样品液制作項下操作,得10ml样品液,取样品液1ml,按标准项下显色依法测定,结果见表1。
3 讨论
在原有基础上的改进,可以促进养心口服液质量的进一步提高,不仅如此,还具有操作便捷以及较高的分辨率等特点。在原有的标准中,主要是采用了乙醚以及正丁醇对人参进行提取,同时在大孔树脂进行交换的基础上,存在较长的检验周期,相对应的成本也比较高,但是却不能获得令人满意的分辨率,与此同时,通过新方法的尝试,不但可以对人参进行简要的鉴别,同时还能够鉴定出其中的另外一种成分,即黄芪,主要呈现出紫色的斑点状。在其中增加氨试液,可以将组分中因为酚羟基对人参以及黄芪所产生的影响进行消除,并且可以使用氨试液用来对甘草进行鉴别。甘草甙主要的属性是二氢黄酮,受到碱性的影响,就会出现开环以及酸化的现象,并且还会进一步转化为二氢黄酮,将其使用正丁醇进行提取,并且使用薄层将显色展开以后可以发现,其中呈现出黄色的斑点。在经过空白试验以后,还可以发现并不会对人参、黄芪还有当归的检验存在较大的影响。
参考文献
[1]王术玲.人参、三七、黄芪的薄层色谱鉴别[J].中国药品标准,2003(02).
[2]柳倩,候桂英,姜泓,徐晶.养心丸质量标准的研究[J].时珍国药研究,1997(02).
[3]黄诺嘉.关于中国医院制剂规范中部分质量标准的探讨[J].中国药品标准,2000(01).
[4]刘训红.中药材薄层色谱鉴别(第1版).天津:天津科技出版社,1990.362.
[5]张桂燕,陆蕴如,张颖,等.香砂六君子丸、散、汤剂中人参总皂贰的含量测定.中成药,1994,16(10):22-23.
关键词:养心口服液;人参;黄芪;甘草;质量标准;薄层层析
养心口服液主要是治疗心气不足的一种药物,在呼吸急促时可以使用,并且对于心悸怔忡以及舌淡脉弱等一些症状具有显著的治疗效果,在临床验证的情况下,可以证实这种药品对于心肌炎的治疗具有十分显著的效果,该药物是由黑龙江某中药医学院进行研制的,并且由哈尔滨某制药公司所生产,在进行质量标准检验的过程中,主要采用了薄层条件,并且按照不同的条件要求对人参、当归以及川穹进行了鉴别,在使用方法方面还存在一定的难度,并且有时存在不灵敏性,同时也没有对专属性进行有效的鉴别,因此需要对原有方法加以进一步的改进,并且在改进的基础上,可以在同一硅胶板上将人参、黄芪以及甘草得到鉴定,具有十分理想的效果,所以希望在本文的基础上可以得到进一步的推广。
1 试剂药品
本次试剂药品主要由四个部分组成,一个是硅胶G薄板,由某化工厂生产,本试验中应用的所有试剂均为分析纯,三是在试验中所需要的养心口服液,由某制药公司提供,均为统一批号下的产品,最后选择了对照品人参皂甙Rg1、黄芪甲甙及甘草对照药材,上述对照药材的提供者为中国药品生物制品鉴定所。
2 质量控制方法的研究
2.1 定性鉴别
首先需要进行定性鉴别,在对人参进行定性鉴别的过程中,先是取样品以及缺少人参的阴性对照液5ml,将其放入过氧化铝柱以及70%浓度的乙醇中进行洗脱,在洗脱完成后将其放在水浴中进行蒸干处理,取适量的正丁醇,在水饱和的前提下将其进一步的溶解,并且转移到分液漏斗中,提取2ml的甲醇准备后续使用,并且取适量的人参药材,将其放在70%的乙醇中进行回流,经过1h后取出,经过过滤以后,再将滤液按照上述方法进行回收,取适量的人参皂贰Rg1对照液,放在同一个硅胶G板上,将氯仿、甲醇以及水按照一定的比例展开13cm,将其晾干以后喷洒适量的磷铂酸甲醇液,用电吹风吹干后直到显色,将其放在日光下进行检视,将供试品色谱和对照品色谱进行对应,其中有蓝色斑点的显示。
五味子的薄层鉴别:取样品5ml与氯仿10ml水浴回流提取30min,取氯仿层挥干,再用氯仿2ml溶解备用,另取五味子药材及处方量阴性空白药材以氯仿回流提取1h,过滤,滤液挥干,再以氯仿溶解点于同一硅胶G板上,以石油醚一甲酸甲醋一甲醇(15:5:1)展开10cm,取出晾干,用10%的磷钼酸甲醇液显色,电吹风吹至斑点显色清晰,日光下检视,供试品与对照品有相对应的蓝色特征斑点。
麦冬的薄层鉴别:取5ml样品液加人0.5ml盐酸、10ml水共煮沸5min,放冷,氯仿20ml萃取,取氯仿层浓缩至2ml备用,取麦冬药材及处方量的阴性对照品水提10min,滤液重复上面操作,各试液点于同一硅胶G板上,以氯仿-丙酮(4:1)展开10cm,取出晾干,喷以10%的硫酸乙醇液,105℃烘至显色清晰,日光下检视,供试品与对照品有相对应的墨绿色斑点。
2.2 含量测定
首先对供试液进行制备,先取适量的样品0.5ml,将其进行洗脱以及收集,在水浴中蒸干以后,使用水饱和的正丁醇进行溶解,再将其转至分离漏斗中,使用正丁醇分别清洗两次,一次使用氢氧化钠溶液进行清洗,一次是用正丁醇饱和盐酸液进行清洗,再分别萃取两次,采用水饱和的正丁醇,在将其合并以后,在水浴中蒸干,使用甲醇进行定容,将其置于10ml的量瓶中准备后续的使用。
紧接着要对阴性对照液进行制备,先取适量的药材,将其按照样品的制作工艺进行制作,制成缺少人参的阴性对照液,将其放入0.5ml的氧化铝柱中进行过滤,按照样品的制备过程进行制备,最终获得阴性对照液。
标准液的制备:取适量的人参皂贰Rg1对照品,加甲醇制成48μg/ml的溶液作对照品溶液。
测定波长组的选择:取一定量的人参皂贰Rg1对照品溶液、供试品及自配处方量阴性空白对照液显色,在400-600nm范围内扫描,对照品与供试品在540nm处有最大吸收,故以540nm为测定波长,另取不同量的三份阴性对照液,以0.5nm间隔的波段找出相应的等吸收点为495nm.即为参比波长。
标准曲线的绘制:精密称取12mg人参皂贰Rg1、于250ml容量瓶中,甲醇定容,摇匀,即得48拌g/ml的标准液。分别吸取0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.4ml标准品液于5ml量瓶中.水浴蒸干,加入2%的香草醛一硫酸液(70%)至刻度,摇匀,60℃水浴中加热15min后取出立即置冰浴中冷却,以0管为空白对照,在540,495nm波长处测定吸收度,求出△A值,结果表明,△A与C符合朗伯一比尔定律,回归方程为:C=61.26417△A-0.44024,r=0.9999。
稳定性实验:取一定量的样品液,按标准曲线项下操作显色依法测定,每隔5min测1次,结果表明吸收度在30min内稳定。
回收率实验:取一定量的人参皂苷Rg1,对照液,准确加入已知浓度的样品液中,按样品液制备项下操作,依法测定计算回收率,结果得平均回收率为100.5%,RSD=1.03%。
样品含量测定:取样品0.5ml过中性氧化铝柱,以下同样品液制作項下操作,得10ml样品液,取样品液1ml,按标准项下显色依法测定,结果见表1。
3 讨论
在原有基础上的改进,可以促进养心口服液质量的进一步提高,不仅如此,还具有操作便捷以及较高的分辨率等特点。在原有的标准中,主要是采用了乙醚以及正丁醇对人参进行提取,同时在大孔树脂进行交换的基础上,存在较长的检验周期,相对应的成本也比较高,但是却不能获得令人满意的分辨率,与此同时,通过新方法的尝试,不但可以对人参进行简要的鉴别,同时还能够鉴定出其中的另外一种成分,即黄芪,主要呈现出紫色的斑点状。在其中增加氨试液,可以将组分中因为酚羟基对人参以及黄芪所产生的影响进行消除,并且可以使用氨试液用来对甘草进行鉴别。甘草甙主要的属性是二氢黄酮,受到碱性的影响,就会出现开环以及酸化的现象,并且还会进一步转化为二氢黄酮,将其使用正丁醇进行提取,并且使用薄层将显色展开以后可以发现,其中呈现出黄色的斑点。在经过空白试验以后,还可以发现并不会对人参、黄芪还有当归的检验存在较大的影响。
参考文献
[1]王术玲.人参、三七、黄芪的薄层色谱鉴别[J].中国药品标准,2003(02).
[2]柳倩,候桂英,姜泓,徐晶.养心丸质量标准的研究[J].时珍国药研究,1997(02).
[3]黄诺嘉.关于中国医院制剂规范中部分质量标准的探讨[J].中国药品标准,2000(01).
[4]刘训红.中药材薄层色谱鉴别(第1版).天津:天津科技出版社,1990.362.
[5]张桂燕,陆蕴如,张颖,等.香砂六君子丸、散、汤剂中人参总皂贰的含量测定.中成药,1994,16(10):22-23.