人白细胞介素18(hIL-18)的纯化及生物学活性的鉴定

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rommer006

【摘要】

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目的:在大肠杆菌中高效表达重组人IL-18(rhIL-18)蛋白,制备具有高纯度、高活性的rhIL-18.方法:用IPTG诱导重组蛋白表达载体pKK223-3/hIL-18进行蛋白表达;菌体经超声破碎分离

【作者】

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杨广民方艳秋谭岩刘力华

【机构】

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吉林省人民医院中心实验室,吉林大学第一医院中心实验室

【出处】

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中国免疫学杂志

【发表日期】

：

2004年12期

【关键词】

：

重组人白细胞介素18 凝胶过滤 T细胞 NK细胞细胞因子

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目的:在大肠杆菌中高效表达重组人IL-18(rhIL-18)蛋白,制备具有高纯度、高活性的rhIL-18.方法:用IPTG诱导重组蛋白表达载体pKK223-3/hIL-18进行蛋白表达;菌体经超声破碎分离包含体,并对包含体进行洗涤、变性和复性处理,用DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换柱纯化复性的rhIL-18;以人外周血单核淋巴细胞,通过T细胞增殖实验、125I-UdR标记的细胞毒实验、ELISA方法检测细胞因子的产生量等方法,测定rhIL-18的生物学活性.结果:在大肠杆菌中成功地诱导、

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