正、反义Heparanase基因荧光真核表达载体的构建及胰腺癌SW1990细胞转染

来源 :昆明医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:harvy_chen
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目的 构建正、反义人肝素酶绿色荧光蛋白真核共表达载体,并转染人胰腺癌SWl990细胞.方法 用EcoRI从pcDNA3-Hpa质粒上切下约1.7kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连人plRES2-EGFP质粒的EcoRI酶切位点上,经BamH I酶切鉴定出正义和反义表达载体,并进一步测序确认.用脂质体法将肝素酶正、反义真核表达载体转染人胰腺癌SW1990细胞,24h后荧光倒置显微镜下检测转染结果.结果 经BamHI酶切后,正义质粒形成5.3kb和1.7kb两条DNA片段,反义重组质粒为6.5kb和0.5
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