灵芝端粒解旋酶基因的克隆与生物学功能

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端粒解旋酶(telomere-linked helicase, Tlh)在维持端粒长度和基因组稳定性中起关键作用。除其基础作用外,解旋酶还在涉及DNA/RNA代谢的细胞过程中担当重要的角色。本研究通过同源序列比对在灵芝中获得Tlh基因,分析发现Tlh基因编码750个氨基酸,其蛋白含有DEXHC-RecQ、DEAD和HELICc结构域,与担子菌中的Tlh蛋白保守性较高。进一步构建灵芝Tlh沉默菌株(Tlhi-9和Tlhi-21),检测Tlh在灵芝中的生物学功能。结果显示,与野生型相比,Tlhi-9和Tlhi-21菌株菌丝生长减缓,菌落直径分别降低23%和24%,生物量分别降低41%和43%;相较野生型,Tlhi-9和Tlhi-21菌株中CMCase活性分别降低39%和43%,而木聚糖酶活性均降低40%;Tlhi-9和Tlhi-21菌株中胞内多糖含量较野生型分别降低38%和40%;Tlhi-9和Tlhi-21菌株中灵芝酸含量较野生型分别降低51%和56%。研究结果说明,Tlh基因参与调控灵芝生长、纤维素酶与木聚糖酶活性及次生代谢。
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