皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建

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【摘要】

：

提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A（Hypodermin A,HA）基因片段,用Xho Ⅰ、Xba Ⅰ消化,将消化后的目的基因HA纯化并

【作者】

：

王艳华殷宏罗建勋蒋锡仕

【机构】

：

中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室,西南民族大学

【出处】

：

动物医学进展

【发表日期】

：

2007年9期

【关键词】

：

皮蝇素A 克隆毕赤酵母表达载体

【基金项目】

：

欧盟项目INCO-DEV-牛皮蝇病控制计划(ICA4-CT-2000-30036)

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提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A（Hypodermin A,HA）基因片段,用Xho Ⅰ、Xba Ⅰ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的裁体pPICZa连接并转化,获得重组表达质粒pPICZa-HA,经PCR、酶切、测序表明,目的基因插入位置、方向和阅读框正确.

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