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【摘要】 目的:探讨UF-1000i尿沉渣分析仪的真菌计数在真菌性尿路感染中的应用价值。方法:将237份无菌操作留取的中段尿标本进行真(细)菌培养鉴定,并在UF-1000i尿沉渣分析仪上进行真菌数量的检测和人工显微镜镜检,分析UF-1000i尿沉渣分析仪的诊断价值。结果:真菌培养阳性31例,以真菌培养结果为金标准,UF-1000i尿沉渣分析仪真菌计数AOC曲线下面积为0.997时,真菌最佳诊断临界值为85.10个/μl, 用该值诊断尿路真菌感染的灵敏度为0.9678,特异度为0.9757,阳性预测值为0.8571,阴性预测值为0.9950;当诊断临界值为161.55个/μl时,诊断尿路真菌感染的特异度为100%,以此11.34%(27/237)的样本可以快速初筛为真菌性尿路感染;当临界值为30.15个/μl时,诊断尿路感染的阴性预测值为100%,以此83.54%(198/237)的样本可以快速排除真菌性尿路感染;人工显微镜检查23例阳性标本也为UF-1000i检测阳性。结论:UF-1000i尿沉渣分析仪检测真菌可作为临床真菌性尿路感染的快速筛检,结合人工显微镜检查可以快速确诊真菌性尿路感染。
【关键词】 UF-1000i; 真菌培养; 真菌计数; 尿路感染
Evaluate the Parameter of Yeast for Urine Flow Cytometer Sysmex UF-1000i in Urinary Tract Infections/ZHANG Qin, LU Hui-xia,SHI Jing-jing,et al.// Medical Innovation of China,2012,9(33):094-095
【Abstract】 Objective:To evaluate the parameter of yeast for urine flow cytomerer Sysmex UF-1000i in urinary tract infections (UTI). Method:A total of 237 specimens were analyzed and then compared with urine culture. Result:The area under the receiver operating curve (AOC) was 0.997 for yeast in UF-1000i and the best cutoff value obtained by AOC analysis was85.10 yeast/μl, analytic parameters such as sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, were 0.9678, 0.9757,0.8571,and 0.9950, respectively. When the cutoff value obtained was 161.55 yeast/μl, the specificity was 100% and 11.34% samples were diagnosed for fungal UTI. Furthermore, the cutoff value was 30.15 yeast/μl, the negative predictive value was 100% and 83.54% samples could be ruled out fungal UTI. Conclusion:The parameter of yeast detected by UF-1000i urine sediment analysis can be used as a rapid screening of clinical fungal UTI, combined with manual microscopic examination can be quickly diagnosed with fungal UTI.
【Key words】 UF-1000i; Yeast culture; Yeast count; Urinary tract infection
First-author’s address:Zhongda Hospital, Southeast University, Nanjing 210009, China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.33.059
尿路感染是临床中较为常见的疾病,真菌引起的尿路感染也占有一定的比例[1],UF-1000i尿液分析仪(以下称UF-1000i)可对尿液中的真菌进行检测[2],有利于真菌引起的尿路感染的快速筛检,笔者对其进行了评价,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本 来源于2011年2-4月本院门诊与住院怀疑尿路感染的患者,经无菌操作留取清洁中段尿共237份,男63份,女174份,年龄5~92岁,尿培养真菌阳性结果31份(其中白色念珠菌18例)。
1.2 主要仪器 日本SYSMEX公司生产的UF-1000i,法国生物-梅里埃公司生产的VITEK2 Compact全自动细菌鉴定药敏分析仪。
1.3 校准品、质控品和试剂 UF-1000i所用校准品、质控品和试剂均为SYSMEX公司生产,细菌鉴定仪所用试剂为生物梅里埃生产。
1.4 操作方法
1.4.1 尿定量培养 取5 μl尿液滴注入血平板,用接种环涂抺,35 ℃过夜,对阳性样本进行真菌计数及鉴定。
1.4.2 UF-1000i尿沉渣分析仪和VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪的操作均按其操作手册进行。 1.4.3 人工显微镜检查 取清洁中段尿一滴于清洁玻片,待干后经革兰染色,油镜下检查真菌。
1.5 统计学处理 采用SPSS 18.0软件包进行统计学处理和分析。
2 结果
2.1 真菌计数与真菌培养结果的相关性,分析UF-1000i真菌数量检测与真菌培养结果相关性见图1。以真菌培养结果为金标准,AOC曲线下面积为0.997时,真菌最佳诊断临界值为85.10个/μl,用该值诊断真菌性尿路感染的灵敏度为0.9678,特异度为0.9757,阳性预测值为0.8571,阴性预测值为0.9950;当诊断临界值为161.55个/μl时,诊断真菌性尿路感染的特异度为100%,以此11.34%(27/237)的样本可以快速初筛为真菌性尿路感染;当临界值为30.15个/μl时,初筛真菌性尿路感染的阴性预测值为100%,以此83.54%(198/237)的样本可以快速排除真菌引起的尿路感染。
图1 真菌计数诊断真菌性尿路感染的AOC曲线
2.2 UF-1000i真菌计数与人工显微镜镜检的结果 在31例真菌培养阳性的标本中,人工显微镜检查阳性23例;这23例阳性标本均为UF-1000i检测阳性(以161.55个/μl 为UF-1000i真菌计数诊断尿路真菌感染的临界值)。
3 讨论
在UF-1000i的尿沉渣通道中,由于真菌有典型的细胞核(含有RNA和DNA),易被荧光染料着色,发出较强的荧光强度,被仪器所检测;同时,通过检测其前向散射光强度反应其面积大小;形成的散点图介于红细胞与白细胞之间[3]。
UF-1000i检测真菌也存在着假阳性的现象,这是由于尿路感染患者中,一部分破碎的白细胞由于其前向散射光强度与真菌相似,同时破碎的白细胞胞膜不完整,较易将荧光染料渗透进细胞内,与破碎的细胞核结合后发出的较强荧光强度也与真菌相似,因此,这种破碎的白细胞在散点图上与真菌散点易发生交叉而被仪器误认为真菌,导致UF-1000i真菌计数的假性增高。
尽管有假阳性的存在,但通过笔者统计,在仪器计数真菌大于161.55个/μl时,对真菌性尿路感染的诊断特异度可达到100%,由此可有11.34%的标本快速初筛为真菌性尿路感染,为临床及时用药节约了时间。同时当仪器计数真菌数小于30.15个/μl时,有83.54%的标本可快速的排除真菌性尿路感染。
在真菌培养阳性的31例标本中,人工镜检和UF-1000i检测双阳性标本23例,人工镜检的特异性较高,但易造成漏检(8/31),UF-1000i对真菌性尿路感染的灵敏度要比人工镜检高,且迅速、简单,UF-1000i检测阳性的标本结合人工镜检则可迅速诊断真菌性尿路感染。
总之,UF-1000i尿沉渣分析仪测定真菌虽然有假阳性的存在,但对诊断真菌性尿路感染具有快速、简便、费用低等优点,对真菌性尿路感染可以起到快速过筛的作用,结合直接显微镜检查[4],更能确认真菌的存在,为临床治疗缩短了时间,也为临床早期用药提供了依据。
参考文献
[1] 陈中举, 李丽, 张蓓,等.2059株中段尿分离菌的分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志, 2009,19(2):225-227.
[2] De R R, Grosso S, Bruschetta G, et al. Evaluation of the Sysmex UF1000i flow cytometer for ruling out bacterial urinary tract infection[J]. Clin Chim Acta, 2010,5(1):1137-1142.
[3] 熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2008:198.
[4]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006,11:871-876.
(收稿日期:2012-07-31) (本文编辑:车艳)
【关键词】 UF-1000i; 真菌培养; 真菌计数; 尿路感染
Evaluate the Parameter of Yeast for Urine Flow Cytometer Sysmex UF-1000i in Urinary Tract Infections/ZHANG Qin, LU Hui-xia,SHI Jing-jing,et al.// Medical Innovation of China,2012,9(33):094-095
【Abstract】 Objective:To evaluate the parameter of yeast for urine flow cytomerer Sysmex UF-1000i in urinary tract infections (UTI). Method:A total of 237 specimens were analyzed and then compared with urine culture. Result:The area under the receiver operating curve (AOC) was 0.997 for yeast in UF-1000i and the best cutoff value obtained by AOC analysis was85.10 yeast/μl, analytic parameters such as sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, were 0.9678, 0.9757,0.8571,and 0.9950, respectively. When the cutoff value obtained was 161.55 yeast/μl, the specificity was 100% and 11.34% samples were diagnosed for fungal UTI. Furthermore, the cutoff value was 30.15 yeast/μl, the negative predictive value was 100% and 83.54% samples could be ruled out fungal UTI. Conclusion:The parameter of yeast detected by UF-1000i urine sediment analysis can be used as a rapid screening of clinical fungal UTI, combined with manual microscopic examination can be quickly diagnosed with fungal UTI.
【Key words】 UF-1000i; Yeast culture; Yeast count; Urinary tract infection
First-author’s address:Zhongda Hospital, Southeast University, Nanjing 210009, China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.33.059
尿路感染是临床中较为常见的疾病,真菌引起的尿路感染也占有一定的比例[1],UF-1000i尿液分析仪(以下称UF-1000i)可对尿液中的真菌进行检测[2],有利于真菌引起的尿路感染的快速筛检,笔者对其进行了评价,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本 来源于2011年2-4月本院门诊与住院怀疑尿路感染的患者,经无菌操作留取清洁中段尿共237份,男63份,女174份,年龄5~92岁,尿培养真菌阳性结果31份(其中白色念珠菌18例)。
1.2 主要仪器 日本SYSMEX公司生产的UF-1000i,法国生物-梅里埃公司生产的VITEK2 Compact全自动细菌鉴定药敏分析仪。
1.3 校准品、质控品和试剂 UF-1000i所用校准品、质控品和试剂均为SYSMEX公司生产,细菌鉴定仪所用试剂为生物梅里埃生产。
1.4 操作方法
1.4.1 尿定量培养 取5 μl尿液滴注入血平板,用接种环涂抺,35 ℃过夜,对阳性样本进行真菌计数及鉴定。
1.4.2 UF-1000i尿沉渣分析仪和VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪的操作均按其操作手册进行。 1.4.3 人工显微镜检查 取清洁中段尿一滴于清洁玻片,待干后经革兰染色,油镜下检查真菌。
1.5 统计学处理 采用SPSS 18.0软件包进行统计学处理和分析。
2 结果
2.1 真菌计数与真菌培养结果的相关性,分析UF-1000i真菌数量检测与真菌培养结果相关性见图1。以真菌培养结果为金标准,AOC曲线下面积为0.997时,真菌最佳诊断临界值为85.10个/μl,用该值诊断真菌性尿路感染的灵敏度为0.9678,特异度为0.9757,阳性预测值为0.8571,阴性预测值为0.9950;当诊断临界值为161.55个/μl时,诊断真菌性尿路感染的特异度为100%,以此11.34%(27/237)的样本可以快速初筛为真菌性尿路感染;当临界值为30.15个/μl时,初筛真菌性尿路感染的阴性预测值为100%,以此83.54%(198/237)的样本可以快速排除真菌引起的尿路感染。
图1 真菌计数诊断真菌性尿路感染的AOC曲线
2.2 UF-1000i真菌计数与人工显微镜镜检的结果 在31例真菌培养阳性的标本中,人工显微镜检查阳性23例;这23例阳性标本均为UF-1000i检测阳性(以161.55个/μl 为UF-1000i真菌计数诊断尿路真菌感染的临界值)。
3 讨论
在UF-1000i的尿沉渣通道中,由于真菌有典型的细胞核(含有RNA和DNA),易被荧光染料着色,发出较强的荧光强度,被仪器所检测;同时,通过检测其前向散射光强度反应其面积大小;形成的散点图介于红细胞与白细胞之间[3]。
UF-1000i检测真菌也存在着假阳性的现象,这是由于尿路感染患者中,一部分破碎的白细胞由于其前向散射光强度与真菌相似,同时破碎的白细胞胞膜不完整,较易将荧光染料渗透进细胞内,与破碎的细胞核结合后发出的较强荧光强度也与真菌相似,因此,这种破碎的白细胞在散点图上与真菌散点易发生交叉而被仪器误认为真菌,导致UF-1000i真菌计数的假性增高。
尽管有假阳性的存在,但通过笔者统计,在仪器计数真菌大于161.55个/μl时,对真菌性尿路感染的诊断特异度可达到100%,由此可有11.34%的标本快速初筛为真菌性尿路感染,为临床及时用药节约了时间。同时当仪器计数真菌数小于30.15个/μl时,有83.54%的标本可快速的排除真菌性尿路感染。
在真菌培养阳性的31例标本中,人工镜检和UF-1000i检测双阳性标本23例,人工镜检的特异性较高,但易造成漏检(8/31),UF-1000i对真菌性尿路感染的灵敏度要比人工镜检高,且迅速、简单,UF-1000i检测阳性的标本结合人工镜检则可迅速诊断真菌性尿路感染。
总之,UF-1000i尿沉渣分析仪测定真菌虽然有假阳性的存在,但对诊断真菌性尿路感染具有快速、简便、费用低等优点,对真菌性尿路感染可以起到快速过筛的作用,结合直接显微镜检查[4],更能确认真菌的存在,为临床治疗缩短了时间,也为临床早期用药提供了依据。
参考文献
[1] 陈中举, 李丽, 张蓓,等.2059株中段尿分离菌的分布及耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志, 2009,19(2):225-227.
[2] De R R, Grosso S, Bruschetta G, et al. Evaluation of the Sysmex UF1000i flow cytometer for ruling out bacterial urinary tract infection[J]. Clin Chim Acta, 2010,5(1):1137-1142.
[3] 熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2008:198.
[4]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006,11:871-876.
(收稿日期:2012-07-31) (本文编辑:车艳)