研究细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)过表达对DC功能的影响及对急性肝衰竭小鼠的治疗作用。
方法利用SOCS1过表达的慢病毒或阴性对照病毒以感染复数(MOI)＝50转染C57BL/6小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)，96 h后转染成功的DC分别标识为SOCS1过表达的DC(DC-SOCS1)和阴性对照慢病毒转染的DC(DC-VNG)。脂多糖(1 mg/L)刺激成熟后收集DC做表面分子流式检测，混和淋巴实验、蛋白质印迹法检测JAK/STAT通路蛋白表达变化。90只6～7周龄健康雄性C57BL/6小鼠分成正常组12只，急性肝功能衰竭组26只，急性肝功能衰竭DC-SOCS1治疗组26只，急性肝功能衰竭DC-VNG治疗组26只，分别通过尾静脉注射0.9%氯化钠溶液、重悬于0.9%氯化钠溶液中的DC-VNG和DC-SOCS1，12 h后利用腹腔注射脂多糖(10 μg/kg)联合D-GalN(600 mg/kg)诱导小鼠急性肝功能衰竭模型建立。观察各组小鼠死亡率和各组肝脏病理表现，检测各组小鼠外周血ALT和AST水平，检测脾脏Treg比例。样本均数比较采用单因素方差分析，分类资料比较使用卡方检验。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐性采用LSD检验。
结果混合淋巴实验结果显示，混合培养比为100∶1的DC-SOCS1组刺激T淋巴细胞的增殖率为(25.87±0.38)%，低于10∶1的mDC组[(84.29±3.25)%]，差异有统计学意义(χ2＝49.821，P<0.01)；IL-10细胞因子浓度高于10∶1的mDC组，差异有统计学意义(F＝20.112，P<0.05)；IL-6细胞因子浓度明显低于10∶1的mDC组，差异有统计学意义(F＝47.718，P<0.05)。与imDC比较，脂多糖刺激成熟后的mDC、DC-VNG、DC-SOCS1组的JAK2表达量(t值分别为0.525、0.523和0.489，均P<0.01)、STAT1表达量(t值分别为0.442、0.400和0.402，均P<0.01)、SOCS1表达量(t值分别为0.322、0.363和1.090，均P<0.01)都明显升高，差异均有统计学意义。其中DC-SOCS1细胞的磷酸化信号转导因子和转录激活因子1(p-STAT1)、磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)的表达量与mDC相比明显降低，差异均有统计学意义(t值分别为－3.840和0.254，均P<0.01)。肝脏病理切片显示，DC-SOCS1治疗组的肝细胞死亡和炎性细胞浸润少于急性肝功能衰竭组和DC-VNG治疗组，并伴有较高的Treg比例。急性肝功能衰竭DC-SOCS1治疗组生存率高于急性肝功能衰竭组，差异有统计学意义(χ2＝12.87，P<0.05)。
结论SOCS1基因通过负向调控JAK2/STAT1通路的信号转导从而抑制DC的成熟过程，SOCS1过表达的DC生物功能表现与调节性树突状细胞相似，可以增加小鼠体内Treg的比例，抑制肝脏过强的免疫反应，调节免疫平衡，对急性肝功能衰竭小鼠有明显治疗效果。