右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化的影响

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目的:通过观察右归丸含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨与成脂分化的影响,为阐明中医肾主骨理论的科学内涵奠定基础。方法:体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,传二代后分为对照组、成骨诱导组、右归丸1组;对照组、成脂诱导组和右归丸2组。显微镜下观察细胞形态变化,碱性磷酸酶(ALP)染色及油红O染色,RT-PCR法测定成骨各组及对照组Runx2、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达,成脂各组及对照组过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、C/EBPα及脂肪酸结合蛋白(a P2)的表达。Western blot法测定成骨与成脂相关蛋白的表达。结果:成骨诱导组和右归丸1组在加入诱导培养液3-4d后ALP活性明显增强。14d后,与对照组比较,Runx2、BMP-2、ColⅠm RNA及蛋白表达显著上调(P<0.05),成脂诱导组和右归丸2组PPARγ、C/EBPα及a P2 m RNA及蛋白表达显著下调(P<0.05),且右归丸组比单纯诱导组更明显。结论:右归丸含药血清可以诱导成骨并显著增强成骨诱导剂诱导BMSCs向成骨细胞分化,并促进成骨细胞成熟作用,同时可以抑制成脂分化。
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