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利用RT-PCR方法扩增出了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)ZJ(浙江)株的子孢子表面抗原5401基因.把这一基因片段克隆到PGEM-T克隆载体上,得到的阳性克隆经PCR鉴定及酶切分析,结果表明重组子(pGEM-T-5401)中含有5401基因,该序列全长为864 bp,序列本身是一个开放阅读框,将克隆得到的基因与国外报道的5401基因比较,有两个碱基发生有义突变,引起两个氨基酸发生突变,核苷酸同源性为99.8%,氨基酸同源性为99.3%.克隆出的5401基因可以用于将来重组疫苗的研究.