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目的探讨人肝内胆管癌相关成纤维细胞（iCAF）的分离、纯化和鉴定,并初步探究其对肿瘤细胞的影响作用。方法肝内胆管癌标本通过酶消化法（Ⅰ型胶原酶与RPMI 1640混合消化液）分离获得原代细胞,并通过密度梯度离心法进行纯化,iCAF的鉴定通过免疫化学、荧光染色及流式细胞检测进行。通过CCK8及Transwell实验观察iCAF条件培养基对胆管癌细胞的影响作用。结果获得的iCAF以长梭形为主,细胞生长密集相互交织形成网状或漩涡状;免疫细胞化学染色及荧光染色显示：α-SMA阳性、FSP-1阳性;流式细胞检测FS