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目的:制备抗HIV-1gp120单克隆抗体(mAb),并建立一种可用于检测gp120的ELISA法。方法:采用基因工程抗原HIV-1gp120免疫BALB/c小鼠,通过B细胞杂交瘤技术制备抗HIV-1gp120的mAb。用ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、效价及特异性。用饱和硫酸铵(SAS)纯化mAb,并用HRP标记后建立双mAb夹心ELISA法。结果:筛选出10株稳定分泌抗HIV-1gp120mAb的杂交瘤细胞株,9株为IgG,其中4株的腹水效价为32×10-4~256×10-4。所得mAb与HIV-1gp41、HIV-1p24及HIV-2gp36Ag均无交叉反应,仅与HIV-1gp120产生特异性反应。用mAb6H9和9H12建立了双夹心ELISA法,检测gp120抗原的灵敏度是10μg/L。结论:获得10株特异性强、效价高的抗HIV-1gp120的mAb,并建立了灵敏度良好的双mAb夹心ELISA法。