缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达

来源 :郑州轻工业学院学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wffg0907

【摘要】

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构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌，对该酶表达条件进行了优化．PCR结果表明，扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1254bp符合．通过纸层析检测，筛选到了阳性克隆，但是

【作者】

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张飞魏涛刘寅何培新

【机构】

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郑州轻工业学院食品与生物工程学院

【出处】

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郑州轻工业学院学报：自然科学版

【发表日期】

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2013年1期

【关键词】

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缬氨酸转氨酶大肠杆菌基因克隆蛋白表达 valine-pyruvate transaminase Escherichia coli gene cloni

【基金项目】

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郑州轻工业学院博士基金资助项目（2010BSJJ020）

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构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌，对该酶表达条件进行了优化．PCR结果表明，扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1254bp符合．通过纸层析检测，筛选到了阳性克隆，但是酶活偏低．SDS—PAGE凝胶电泳显示目的蛋白表达量较低．酶表达优化结果显示：蛋白胨浓度12g／L，IPTG浓度0．4mmol／L，经过8h诱导，酶活达到最大值．

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