【摘 要】
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目的采用免疫荧光染色法研究大鼠挫伤骨骼肌中Pax7、MyoD和MyoG基因相对表达量与损伤时间之间的关系。方法 84只健康成年雄性SD大鼠(200±5g)随机分为14组(n=6):空白对照组、
【机 构】
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山西医科大学法医学院; 山西省太原市公安局迎泽分局;
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目的采用免疫荧光染色法研究大鼠挫伤骨骼肌中Pax7、MyoD和MyoG基因相对表达量与损伤时间之间的关系。方法 84只健康成年雄性SD大鼠(200±5g)随机分为14组(n=6):空白对照组、损伤0h、4h、8h、12h、24h、36h、48h、60h、3d、4d、5d、6d、7d组,采用改良自由落体法制作大鼠骨骼肌挫伤模型,分别在各损伤时间点腹腔过量注射戊巴比妥钠(300mg/kg)处死大鼠,取大鼠挫伤部位骨骼肌,对照组大鼠直接处死后相同部位取材。部分检材立即用4%多聚甲醛固定,进行苏木精-伊红(HE)染色;其余检材立即于-80℃保存,进行免疫荧光Pax7、MyoD及MyoG染色,采用TissueFAXS 200仪器对切片进行扫描,随机选取多个不同区域,计数单位面积内阳性细胞的个数。利用SPSS 13.0软件对实验结果进行单因素方差分析。结果①HE染色结果:骨骼肌损伤后,肌纤维坏死及炎性细胞浸润和大量新生纤维组织修复等过程,证明本次实验造模成功;②免疫荧光染色结果:Pax7、MyoD、MyoG的表达呈现时序性变化,单位面积内Pax7与MyoD阳性细胞的数量在损伤3d达到高峰,且与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);单位面积内MyoG阳性细胞的数量在损伤3d后开始增加,并一直持续到损伤7d,且与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论 Pax7、MyoD、MyoG的表达随时间呈现时序性变化,可以为法医学中损伤时间的推断提供一定的参考依据。
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