人骨髓细胞外基质的制备及其结构成分

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songxin_gkong
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背景:细胞外基质可以在体外模拟细胞微环境,使干细胞在体外大量增殖的同时具有良好的干细胞特性。目的:制备人骨髓细胞外基质并分析其结构成分。方法:取第4代人骨髓细胞培养14 d,在最后8 d换成膜诱导液,经脱细胞处理后制备人骨髓细胞外基质。倒置显微镜和扫描电镜观察人骨髓细胞外基质表面形态。免疫荧光染色观察脱细胞处理前后Ⅰ型胶原和二聚糖的变化。将人牙周膜干细胞接种于人骨髓细胞外基质、纤粘连蛋白包被的六孔板和普通培养板,比较不同基质对人牙周膜干细胞细胞形态和黏附的影响。结果与结论:化学物理联合脱细胞处理可以获得结构完整的人骨髓细胞外基质膜片,Ⅰ型胶原和二聚糖在去细胞处理前后结构和含量无明显差异。接种在细胞外基质上生长的人牙周膜干细胞,按照细胞外基质的轨道有序生长,不同于原有细胞形态;相同时间人牙周膜干细胞在细胞外基质上贴壁数量较多。表明有效的脱细胞处理可以得到结构完整的细胞外基质网状支架,相关蛋白成分未因脱细胞而明显丧失,细胞外基质影响接种细胞的形态、促进细胞黏附。提示可利用细胞外基质模型模拟体内干细胞生长微环境,在体外获得大量高质量的成体干细胞。
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