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本研究以羧甲基纤维素钠为唯一碳源作初筛培养基,利用刚果红变色圈法从张弓老酒酒业有限公司大曲中分离得到一株高产的纤维素酶细菌D39.经细菌形态学观察,生理生化实验,并结合16SrDNA序列分析,初步鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).并通过单因素试验和响应面试验优化确定最佳产酶条件为:接种量4％,培养时间3 d,pH值4.优化后其酶活为1 014 U/mL,与优化前相比产酶能力提高1.3倍.本研究结果可为后续提高酿酒原料利用率,缩短发酵时间,以及控制大曲发酵培养工艺提供参考依据.