人血清胰岛素原单克隆抗体夹心酶联免疫法的建立

来源 :中国糖尿病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wgy_2003_9
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目的建立灵敏、特异的酶联免疫分析法测定人血清胰岛素原,用以评价胰岛β细胞功能。方法选用可同时与胰岛素原形成夹心结合的抗人C肽单抗和抗人胰岛素单抗,分别包被塑料微孔条作团相抗体和生物素化后作液相抗体,再以亲和素连接的辣根过氧化物酶放大检测信号,通过酶底物显色,判定胰岛素原浓度。结果方法的灵敏度为0.9pmol/L,曲线工作范围0.9~200pmol/L,批内批间变异系数分别小于8.9%和11.2%,平均回收率94%(82%~114%),稀释曲线和标准曲线平行,方法与高浓度的人胰岛素和C肽(5000pmol/L)均未见交叉反应。结论本方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便和无同位素污染等优点,适于大批量标本测定胰岛素原及其临床意义的深人探讨。
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