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目的
探讨下调微小RNA(miR)-19a的表达对人脑胶质瘤细胞株U87侵袭能力的影响及其机制。
方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测转染miR-19a抑制物的效率。转染后48 h,采用Western blot法检测U87细胞中多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)的表达,并通过Transwell实验检测U87细胞的侵袭能力。构建报告质粒,于转染后72 h用荧光素酶报告实验验证miR-19a和LRIG1的相互作用。
结果FQ-PCR结果显示转染miR-19a抑制物后, U87中miR-19a的表达量较对照组降低了(78. 2±5. 1)%,差异有统计学意义(P< 0. 01)。转染miR-19a抑制物后,U87穿膜细胞数较对照组明显减少,分别为(25. 9±3. 9)个和(85. 3±6. 1)个(P< 0. 01)。荧光素酶报告实验结果显示,下调miR-19a后野生型报告质粒的荧光素酶活性较对照组升高(4. 89±0. 26)倍(P<0. 01),而突变型质粒的荧光素酶活性较对照组无明显变化。Transwell实验结果表明在下调miR-19a后,LRIG1沉默组的穿膜细胞数较对照组明显增加,分别为(47. 8± 3. 1)个和(22. 7±4. 2)个(P<0. 05)。
结论下调miR-19a可以抑制U87细胞的侵袭力,其机制可能是上调LRIG1的表达。