【摘 要】
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设计合成含适当酶切位点的PCR引物，以人的全长THcDNA为模板，进行PCR扩增反应，得到了人酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）全长及催化核心序列，将其分别插入谷胱甘肽巯基转移酶（G
【机 构】
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首都医科大学化教研室,北京市神经科学研究所
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设计合成含适当酶切位点的PCR引物，以人的全长THcDNA为模板，进行PCR扩增反应，得到了人酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）全长及催化核心序列，将其分别插入谷胱甘肽巯基转移酶（GST）融合表达载体pGEX-4T-1，转化入大肠杆菌BL21，以IPTG诱导表达，SDS-PAGE、western blotting分析表达产物。结果获得了编码N-端缺失145个氨基酸的酪氨酸羟化酶催化结构域的cDNA片段及带一定内切酶识别位点的全长片段，表达载体构建正确。插入片段序列与人THmRN
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