失血性休克对大鼠肠黏膜屏障Occludin表达的影响

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目的 探索失血性休克对肠黏膜细胞紧密连接的作用以及对Occludin表达的影响.方法 SD大鼠24只,按随机数字表法分为假手术组、失血性休克0.5h组、2h组、4h组,每组6只.采用Wiggers改良法制备失血性休克大鼠模型.腹主动脉取血,活性比色法测定血浆二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性;分光光度计法测定血浆D-乳酸(D-Lactate,D-LA)含量;比浊法测定血浆内毒素含量;肠系膜淋巴结和肝组织细菌培养检测细菌移位情况;光镜观察大鼠肠黏膜病理变化;电镜观察肠上皮细胞超微结构;RT-PCR测定小肠黏膜Occludin的mRNA表达;Westem blot与免疫组化法测定Occludin蛋白表达. 结果 失血性休克0.5h组DAO、D-LA及内毒素含量分别为(72.68 ±10.24) mg/ml、(9.28±0.53) μg/ml、(41.25±3.68) pg/L,较假手术组明显升高(P<0.05).2h组肝组织和肠系膜淋巴结均培养出细菌,4h组菌落量明显增高(P<0.01).小肠上皮的形态及超微结构在休克0.5h组即发生破坏,随着失血时间延长,破坏越严重.失血性休克0.5h组肠黏膜OccludinmRNA降低(P<0.01);2 h组降低更明显(P<0.05).失血性休克0.5h组Occludin蛋白定位表达强度呈弱阳性;2h组Occludin蛋白量较0.5h组明显降低(P<0.0l),定位表达亦呈阴性. 结论 Occludin分子在大鼠肠黏膜上皮细胞中的表达随失血性休克的时间延长下降,推测可能是导致细胞紧密连接损伤的重要基础。

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