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目的 构建由人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调节的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)和人白细胞介素12(hIL-12)融合基因表达载体.方法 利用聚合酶链反应(PCR)分别扩增hTERT启动子基因、HSV-TK基因和hlL-12 p70基因,并将其分别克隆至pShuttle载体上,合成pShuttle-hTERTp-HSV-TK-linker-IL-12融合基因表达载体,并对所合成的载体酶切、测序检验.结果 各基因片段成功扩增,大小分别为1084、1173、1557 bp,并成功联结至pShuttle载体上.对所构建新载体分别行酶切鉴定,各融合基因片段大小与预计大小相符,DNA序列测定结果显示,与目标序列完全一致,无突变发生.结论 成功构建肿瘤特异性启动子调控的融合基因表达载体pShuale-hTERTp-HSV-TK-linker-IL-12。