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目的
探索甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞株NALM-6的作用以及对细胞中微RNA(miRNA)表达水平的影响。
方法用不同浓度5-Aza-CdR处理NALM-6细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,采用荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测5-Aza-CdR处理后细胞DNA甲基转移酶(DNMT)基因mRNA表达水平的变化,采用miScript miRNA PCR Array芯片检测去甲基化后细胞中表达量发生改变的miRNA。
结果NALM-6细胞经不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间后,细胞生长受抑,最高抑制率达(74.163±0.381)%。5-Aza-CdR作用浓度与DNMT基因mRNA表达水平呈反比,浓度为1 000 μmol/L的5-Aza-CdR作用细胞72 h后,DNMT-1的相对表达量降至0.453±0.021,DNMT-3L的相对表达量为0.003±0.001,DNMT-3B的相对表达量为0.395±0.019。miScript miRNA PCR Array筛选出3个miRNA(miR-184、miR-23a-3p、miR-34a-5p)与DNA甲基化相关。
结论5-Aza-CdR可下调NALM-6细胞中DNMT基因的表达,并对细胞增殖有抑制作用。miR-184、miR-23a-3p和miR-34a-5p在B-ALL的发生、发展中与DNA甲基化相关。